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詳細介紹
產品簡介
Stable 高轉化效率菌株是逆轉錄病毒/慢病毒載體系統推薦使用的菌株，特別適合于慢病毒或具有末
端重復序列 DNA 片段的克隆。基因組含有 recA1 和 relA1 突變，可有效抑制長片段末端重復區(qū)的重
組，降低錯誤重組的概率；同時含有核酸酶 endA1 突變，避免了提取質粒過程中核酸酶的污染，大
大提高了高純度病毒質粒的產量和質量。lacZΔM15 的存在使 Stable 可用于藍、白斑篩選，此菌株
具有四環(huán)素和鏈m素抗性。利用該菌株克隆含有重復序列的 DNA 時，推薦在 30 ℃進行培養(yǎng)。經
pUC18 質粒轉化檢測，Stable 感受態(tài)細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
Stable
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F' proAB lacIq ?(lacZ)M15 zzf::Tn10 (TetR) ?(ara-leu) 7697 araD139 fhuA ?lacX74 galK16 galE15 e14- φ80
?lacZ?M15 recA1 relA1 endA1 nupG rpsL (StrR) rph spoT1 ?(mrr-hsdRMS -mcrBC)
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 30 ℃預熱），后置于 30 ℃搖床復壯 60 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上：若克隆的質粒中含有重復
序列時，將平板置于于 30 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 24 h；否則，則可以將平板置于 37 ℃過夜培養(yǎng)。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保優(yōu)良轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
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