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引物與探針的區(qū)別與聯(lián)系介紹
一、探針是電測(cè)試的接觸媒介，為高精密型電子五金元器件。
二、原理作用：
1.探針是一小段單鏈DNA或者RNA片段(大約是20到500bp)，用于檢測(cè)與其互補(bǔ)的核酸序列。雙鏈DNA加熱變性成為單鏈，隨后用放射性同位素(通常用磷-32)、熒光染料或者酶(如辣根過氧化物酶)標(biāo)記成為探針。磷-32通常被摻入組成DNA的四種核苷酸之一的磷酸基團(tuán)中，而熒光染料和酶與核酸序列以共價(jià)鍵相連。
2.當(dāng)將探針與樣品雜交時(shí)，探針和與其互補(bǔ)的核酸(DNA或RNA)序列通過氫鍵緊密相連，隨后，未被雜交的多余探針被洗去。最后，根據(jù)探針的標(biāo)記物種類，可進(jìn)行放射自顯影、熒光發(fā)光、酶聯(lián)化學(xué)發(fā)光等方法來判斷樣品中是否，或者何位置含有被測(cè)序列(即與探針互補(bǔ)的序列)。
三、區(qū)別與聯(lián)系：
1.引物設(shè)計(jì)的用途:用于PCR擴(kuò)增技術(shù)。引物設(shè)計(jì)的實(shí)質(zhì)是—小段單鏈DNA或RNA,在核酸合成反應(yīng)時(shí)，作為每個(gè)多核苷酸鏈進(jìn)行延伸的出發(fā)點(diǎn)而起作用的多核苷酸鏈。
2.探針設(shè)計(jì)的用途:用于標(biāo)記待定的核苷酸片斷，用與特異性地、定量地檢測(cè)核酸的量。探針設(shè)計(jì)的實(shí)質(zhì)是在紫外-可見-近紅外區(qū)有特征熒光，并且其熒光性質(zhì)(激發(fā)和發(fā)射波長、強(qiáng)度、壽命、偏振等)可隨所處環(huán)境的性質(zhì)，如極性、折射率、粘度等改變而靈敏地改變的一類熒光性分子。