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安諾倫(北京)生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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內(nèi)化抗體篩選

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更新時(shí)間:2020-05-09 15:10:33瀏覽次數(shù):2004次

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抗體或肽段可與哺乳動(dòng)物細(xì)胞表面的受體特異性結(jié)合,通過(guò)受體介導(dǎo)的胞吞作用進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi),此類抗體或抗體片段被稱為內(nèi)化抗體。內(nèi)化抗體往往作為一種定向運(yùn)載藥物、毒素、酶或者DNA的載體,取得廣泛的應(yīng)用。

 抗體或肽段可與哺乳動(dòng)物細(xì)胞表面的受體特異性結(jié)合,通過(guò)受體介導(dǎo)的胞吞作用進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi),此類抗體或抗體片段被稱為內(nèi)化抗體。內(nèi)化抗體往往作為一種定向運(yùn)載藥物、毒素、酶或者DNA的載體,取得廣泛的應(yīng)用。

  艾柏森生物科技有限公司可為客戶提供基于絲狀噬菌體和T7λ噬菌體,構(gòu)建噬菌體展示抗體庫(kù)和肽庫(kù),進(jìn)行內(nèi)化抗體的高通量篩選服務(wù):

內(nèi)化抗體篩選;Internalizing Antibody Screening

★ 技術(shù)流程:

1. 構(gòu)建抗某種膜蛋白受體的次級(jí)抗體庫(kù);

2. 將新鮮制備的、約1011噬菌體抗體與陰性細(xì)胞(膜蛋白受體-)相混合并孵育一定時(shí)間,以去除抗體庫(kù)中能夠與膜蛋白受體相結(jié)合的非特異性抗體;

3. 孵育混合物的上清再與陽(yáng)性細(xì)胞(膜蛋白受體+)共同孵育,用*培養(yǎng)液多次洗滌細(xì)胞;

4. 將細(xì)胞重懸于適量的培養(yǎng)液中,置于細(xì)胞培養(yǎng)箱,適宜溫度下孵育一段時(shí)間,讓結(jié)合于細(xì)胞表面的噬菌體抗體內(nèi)化;

5. 用緩沖液洗滌細(xì)胞,去除未內(nèi)化但仍結(jié)合于細(xì)胞上的噬菌體抗體

6. 凍融并超聲破碎細(xì)胞,胰酶消化被內(nèi)化的噬菌體,感染大腸桿菌,進(jìn)行下一輪的擴(kuò)增和篩選。

艾柏森生物科技有限公司可為客戶提供多種受體的內(nèi)化抗體的篩選服務(wù):EGFR,CTLA4,HER2,CD20,CD3,CD59,CD33等

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