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蛋白酶K的應用

時間:2023/2/9閱讀:1261
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   近年來,隨著對蛋白酶K研究的深入,該酶的應用范圍不僅在醫療診斷及科研領域得到了十分廣泛的應用,該酶還作為替代其它作用范圍較窄的蛋白酶,主要應用于造紙、工業制革、飼料生產、食品加工等行業中。此外,該酶還可以替代傳統的通過化學方法處理原材料的方法,減少污染。
  在各行各業中,蛋白酶K的主要用途有:
①在分離DNA和RNA的過程中,用于核酸酶的蛋白水解失活。
蛋白酶K能降解與核酸結合的蛋白質,促進蛋白與核酸的分離,因此該酶在提取高分子量的核酸時具有很大的優勢。蛋白酶K還常被用于RNA提取過程中抑制和降解RNase,防止提取的RNA被降解。RNA的質量對于cDNA合成、Northem印跡及雜交分析及體外翻譯等實驗的成敗至關重要。但是RNA極不穩定、易于被環境中廣泛存在的RNase降解,而利用蛋白酶K可創造一個不含RNase的環境、以防止在提取RNA時被RNase污染,因此該酶的使用是成功提取RNA的關鍵。在核酸提取實驗中蛋白酶K的工作濃度大約是0.05-0.2mg/mL,一般情況下,提取一個樣本的核酸大約需要0.1mg的蛋白酶K ,而在實際使用過程中,為了增加核酸提取效率,通常會將蛋白酶K進行加量使用。核酸檢測量劇增,造成對蛋白酶K需求激增,蛋白酶K原有的供需平衡被迅速打破,導致蛋白酶K一夜之間成為了緊缺的防疫物資。
②在生活和工業用水中滅活病毒。
病毒外層結構一般以衣殼蛋白為主,因此蛋白酶K可以對病毒表面的蛋白進行破壞,進而造成病毒因結構不完整不再具有攻擊宿主細胞的能力。有研究結構表明,在蛋白酶K濃度為67.51ug/mL條件下對純水和生活污水中病毒處理lh,其對病毒的滅活率分別達到了99.4%和49.4%,而處理3h時,其病毒滅活率分別為>99.9%和81.8%。用含蛋白酶K的消毒劑對病毒滅活的優點是消毒劑為蛋白質,無污染,不產生有害消毒產物,是一種高效且環保的消毒方法。
③在肉類嫩化中的應用
蛋白酶K能分解肉中肌纖維與結締組織的蛋白質,甚至可以分解彈性蛋白及膠原蛋白,使肉類的各組織結構發生改變,如肉中部分肽鍵斷裂,吸水膨脹,質地變嫩,增強肉的口感。
④在其它生物行業中的應用,主要包括:
1)用于去除內毒素結合的陽離子蛋白,如溶菌酶和核糖核酸酶A。
2)可用于分離肝、酵母和綠豆線粒體
3)用于測定酶在細胞膜上的定位
4)用于石蠟包埋組織切片的處理,暴露用于抗體標記的抗原結合位點。
5)用于可傳播海綿狀腦病(TSE)研究中朊病毒腦組織樣本蛋白的消化。
   蘇州阿爾法生物14年專注于實驗室儀器設備、生物試劑、實驗耗材供應,提供的生物試劑包括天根試劑盒、碧云天試劑、轉染試劑、elisa試劑等應用于細胞生物學、分子生物學、免疫組化學等。


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