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淺析ODS填料的操作要點及注意事項

閱讀:2699      發布時間:2022-9-19
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  ODS填料的粒度主要影響填充柱的兩個參數,即柱效和背壓。粒度越小,其表面積越大,填充柱的柱效超高;然而粒度越小,柱壓越大,柱壓的增加限制了粒度小于3pm的ODS填料應用。在相同選擇性條件下,提高柱效可提高分離度,但不是因素。
  如果固定相選擇是正確,但是分離度不夠,那么選用更小粒度的ODS填料是很有用的。3umODS填料填充柱的柱效比相同條件下的5pmODS填料的柱效提高近30%;然而,3um的色譜柱的背壓卻是5um的2倍。與此同時,柱效提高意味著在相同條件下可以選用更短的色譜柱,即相同的塔板數或分離能力,但是柱長更短,以縮短分析時間。另外,可以采用低粘度的溶劑做流動相或增加色譜柱的使用溫度,比如用乙睛代替甲醇,以降低色譜柱的壓力。
  ODS填料操作要點
  1.首先對流動相進行過濾,根據需要選擇不同的濾膜,一般為有機系和水系,常用的孔徑為0.20um和0.45um。
  2.對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。
  3.正常情況下,儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘,然后再進入測試用流動相(如流動相為緩沖試劑,則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘,直至色譜柱中有機相沖凈為止)。
  4.一般情況下,流動相沖洗20-30分鐘后,儀器方可穩定,重要的是儀器基線走后,方可進樣測試。
  5.同時進兩針標樣,將其結果相比較,其結果的比值在0.98-1.02之間后,就可以正式進行樣品的測試了。
  6.樣品測試結束后,就要進行色譜儀及色譜柱的清洗和維護。如流動相為緩沖試劑,同樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘,方可用有機相進行保護,否則,有損色譜柱。
  7.關機時,先關計算機,再關液相色譜。
  8.填寫登記本,由負責人簽字。
  ODS填料注意事項
  1.流動相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。
  2.柱子是非常脆弱的,次做的方法,先不要讓液體過柱子。
  3.所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。
  4.壓力不能太大,不要超過150kgf/cm2。
  5.因為緩沖試劑遇有機溶劑,會結晶,有損色譜柱,所以,每次由有機相變流動相或流動相變有機相均需用蒸餾水清洗。

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