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細胞克隆實驗科研實驗技術服務介紹

閱讀:114          發布時間:2024-9-20
細胞克隆實驗


應用簡介
       克隆形成及細胞克隆接種存活率,通過觀察單細胞集落形成情況,來計算克隆形成率,了解其增殖能力。
技術原理
       單個細胞在體外持續增殖6代以上時細胞數量已達60個左右,此細胞群體成為克隆或集落,大小在1.0-2.0mm之間。集落形成率表示細胞的獨立生存能力,各種理化因素可能導致細胞的克隆形成能力發生改變,通過計數克隆形成率,可對單個細胞的增殖潛力做定量分析,了解細胞的增殖率和對生存環境的適應性。軟瓊脂培養或平板克隆是zui常用的方法。
實驗方法

技術總結
       1、試驗成功的關鍵是細胞懸液的制備和接種密度。細胞一定要分散得好,不能有細胞團,接種密度不能過大。
       2、細胞在進行克隆形成實驗時要求有95%以上的分散度,否則結果的準確度會受到很大影響。
       3、克隆形成率公式:克隆形成率=(克隆數/接種細胞數)×100%,細胞克隆形成率即細胞接種存活率,表示接種細胞后貼壁的細胞成活并形成克隆的數量。
       4、一般初代培養細胞克隆形成率弱,傳代細胞系強;二倍體細胞克隆形成率弱,轉化細胞系強;正常細胞克隆形成率弱,腫瘤細胞強。


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