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番紅固綠染色科研實驗技術服務介紹

閱讀:337          發布時間:2024-9-26
番紅固綠染色

番紅-固綠染色
       番紅-固綠染色(軟骨)在涉及關節軟骨及軟骨下骨的形態學研究中,常需聯合使用多種染料以顯示其組織學結構。其中,起源于上世紀60年代的番紅O(safranin O)-固綠(fast green)染色因可以直觀反映關節軟骨、軟骨下骨和骨組織的結構而備受青睞。軟骨呈紅色,成骨呈綠色。
技術原理
       番紅-固綠(軟骨)染色法的染色原理在于嗜堿性的軟骨和堿性染料番紅O結合呈現紅色,嗜酸性的骨和酸性染料固綠結合而成綠色或者藍色,與呈現紅色的軟骨對比鮮明,從而將軟骨組織和骨組織區分開。番紅O是一種結合多陰離子的陽離子染料,其顯示軟骨組織是基于陽離子染料與多糖中陰離子基團(硫酸軟骨素或硫酸角質素)結合。番紅O著色與陰離子的濃度近似成正比關系,間接反映基質中蛋白多糖的含量和分布。當軟骨收到損傷時,軟骨中的糖蛋白會釋放出來,使基質成分分布不均勻,從而導致番紅O淡染或不著色。通過圖像分析軟件可以對番紅O染色的軟骨基質進行定量分析。固綠與膠原纖維結合,不宜褪色。
實驗步驟

實驗結果展示:

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番紅固綠-骨>
注意事項
       1、注意固綠的上色程度,番紅不要掩蓋綠色。
       2、切片分化時間應恰當,以背景呈綠色為宜。分化過度容易導致切片不著色,分化不足容易導致切片著色過深。
送樣運輸要求:
       1、植物樣本置于20倍樣本體積的FAA固定液中固定24h以上,常溫運輸送樣。
       2、切勿冷凍結冰。


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