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流動(dòng)相需要注意的事項(xiàng)

閱讀:328      發(fā)布時(shí)間:2022-10-12
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流動(dòng)相是影響液相色譜的關(guān)鍵因素。一個(gè)理想的液相色譜流動(dòng)相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測(cè)器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。高效液相色譜法中的流動(dòng)相主要用水性溶劑、有機(jī)溶劑或它們的混合液。但是如何配制,選擇配制的方法不同,分析結(jié)果特別是保留時(shí)間,是會(huì)有顯著差別的。高效液相色譜法中的流動(dòng)相主要用水性溶劑、有機(jī)溶劑或它們的混合液,水性溶劑也常用于緩沖液。常因資料上表示的內(nèi)容和實(shí)際的配制方法不同,而產(chǎn)生流動(dòng)相的差異,影響了色譜圖和分析結(jié)果。一般來(lái)說(shuō),溶劑的混合按體積比(V/V)或重量比(W/W)進(jìn)行。溶液的體積因溫度而變化,所以按重量比混合可調(diào)制再現(xiàn)性較好的混合溶劑,但由于操作較麻煩,通常多用體積比混合。只要沒有特別標(biāo)明,就可按體積比進(jìn)行混合,但在特殊情況下,如胺類粘度高的溶液混合時(shí),有時(shí)用重量—體積比(W/V)的方法。


液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的,因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn):

a、流動(dòng)相對(duì)樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中(或長(zhǎng)時(shí)間保留在柱中)。流動(dòng)相溶解度達(dá)不到要求時(shí),盡量選用流動(dòng)相中含有的比例較大的成分,以減輕進(jìn)樣對(duì)流動(dòng)相的影響造成基線不穩(wěn)。

b、流動(dòng)相與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng),選用流動(dòng)相配置對(duì)色譜峰影響最小。

c、流動(dòng)相的黏度要盡量小,以便得到好的分離效果;降低柱壓降,延長(zhǎng)泵的使用壽命(可運(yùn)用提高溫度的方法降低流動(dòng)相的黏度)。

d、流動(dòng)相的物化性質(zhì)要與使用的檢測(cè)器相適應(yīng)。如使用UV檢測(cè)器,最好使用對(duì)紫外吸收較低的溶劑配制。流動(dòng)相組成溶劑均達(dá)不到要求時(shí),選取的溶劑應(yīng)保證在設(shè)定波長(zhǎng)內(nèi)無(wú)紫外吸收。

e、流動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低,否則容易產(chǎn)生氣泡,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無(wú)法進(jìn)行。

f、在流動(dòng)相配制好后,一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測(cè),還可以防止流動(dòng)相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。


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