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Invitrogen轉染試劑性能解析

閱讀:124      發布時間:2025-7-30
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  一、轉染效率:覆蓋廣泛細胞類型的高效遞送
 
  核心優勢
 
  Invitrogen轉染試劑(如Lipofectamine 3000、2000、RNAiMAX等)以高轉染效率著稱,適用于哺乳動物細胞、昆蟲細胞、原代細胞及干細胞等多種類型。例如:
 
  Lipofectamine 3000:在H9胚胎干細胞中的轉染效率達52%,顯著高于Lipofectamine 2000的18%;在HEK293、HeLa等常見細胞系中,GFP轉染效率超過90%。
 
  RNAiMAX:專為siRNA/miRNA設計,1nM濃度即可實現高效基因沉默,適用于高通量RNAi篩選。
 
  Neon電穿孔系統:通過鍍金電極吸頭產生均勻電場,對Jurkat、小鼠胚胎干細胞等難轉染細胞的轉染效率超75%。
 
  技術支撐
 
  脂質體納米顆粒技術(如Lipofectamine 3000):通過優化脂質體與核酸的比例,形成穩定復合物,提升細胞膜融合效率。
 
  電穿孔均勻電場設計(Neon系統):避免傳統電轉杯的邊緣效應,減少細胞損傷,同時提高轉染均勻性。
 
  二、細胞毒性:低損傷保障細胞活性
 
  毒性控制機制
 
  Invitrogen試劑通過以下設計降低細胞毒性:
 
  溫和型脂質體配方(如Lipofectamine LTX):采用非動物源性成分,減少免疫原性反應,細胞存活率>90%。
 
  可調節轉染條件:用戶可根據細胞類型優化試劑濃度(如24孔板中Lipofectamine 3000最低用量0.75μL),進一步降低毒性。
 
  無需換液設計:轉染后無需移除復合物或更換培養基(如Lipofectamine 2000),減少操作對細胞的機械損傷。
 
  數據對比
 
  Lipofectamine 3000 vs. 競品:在iPSC克隆形成率測試中,Lipofectamine 3000的克隆形成率顯著高于FuGENE HD,表明其對干細胞活性影響更小。
 
  Neon系統安全性:小鼠體內實驗顯示,使用Invivofectamine 3.0轉染后,血液化學指標與未轉染組無顯著差異,證明其低毒性特性。
 
  三、操作便捷性:簡化流程提升實驗效率
 
  標準化操作流程
 
  Invitrogen試劑提供“混合-孵育-轉染”三步法,例如:
 
  Lipofectamine系列:將試劑與核酸在Opti-MEM中混合,室溫孵育10-20分鐘后加入細胞,無需復雜清洗步驟。
 
  Neon系統:通過預優化協議(如Jurkat細胞電穿孔參數:脈沖電壓1350V,脈沖寬度30ms),用戶可直接調用,減少條件摸索時間。
 
  高通量適配性
 
  自動化兼容:Lipofectamine 2000支持機器人系統操作,適用于大規模篩選(如96/384孔板轉染)。
 
  小包裝設計:推出0.1mL Lipofectamine LTX試劑,降低小規模實驗成本,避免試劑浪費。
 

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