當前位置:> 供求商機> Y1207-100-飽和油紅O染色液
一、油紅O染液的配制
脂質(Lipid)是中性脂肪、類脂及其衍生物的總稱,其共同的物理特性是不溶于水,易溶于有機溶劑(如乙醇等)。人體的脂肪主要有兩種:1、儲存脂肪,如中性脂肪,主要分布于皮下、腎、胰腺等部位。2、結構脂肪,如類脂(磷脂、糖脂、膽固醇等),主要分布于細胞內。中性脂肪(Neutral fat)是由三分子脂肪酸和一分子甘油組成的脂類,呈中性。中性脂肪是儲存能量的方式之一,在氧化時釋放出能量。中性脂肪染色經常采用蘇丹Ⅱ、蘇丹Ⅲ、蘇丹Ⅳ、蘇丹黑B、油紅O法等。傳統方法采用蘇丹染料,近發現偶氮染料油紅O更適合脂肪的染色。油紅O是很強的脂溶劑和染脂劑,較易不甘油三脂結合呈小脂滴狀,不磷脂結合力稍差,其染色原理一般認為是物理上的溶液作用或吸附作用,借溶液作用使脂肪染色。染料在細胞內脂質的溶解度較原溶劑中的溶解度更大,所以在染色時染料就從有機溶劑轉移入脂質而使脂肪染色。
油紅O染色液(細胞)簡稱ORO染色液,可顯示小的脂滴,可優先為脂類從溶劑中吸附染料。標本不采用含有乙醇的固定液,如需要固定可采用10%福爾馬林)。脂肪陽性染色結果呈橘黃至紅色,但具體顏色因脂質濃度而定。
1.油紅O 1g
異丙醇 100ml
2.油紅O 足量
異丙醇 100ml
配成油紅O飽和溶液,使用時以油紅O飽和液一份加蒸餾水兩份,過濾后使用。
二、染色程序
1.切片用甲醛―鈣固定10分鐘;
2.蒸餾水洗;
3.60%異丙醇浸洗;
4.1由紅O染液10分鐘(染液可回收再利用);
5. 60%異丙醇分色至背景五色;
6.蒸餾水洗;
7.Mayer蘇木精復染;
8.自來水洗(藍化)1~3分鐘;
9.蒸餾水洗;
10.甘油明膠封片。
結果:組織細胞中脂滴呈橘紅色,核呈藍色。
油紅O脂類染色澄
示大鼠脂肪肝中肝細胞內染為紅色大脂
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