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技術(shù)文章

培養(yǎng)凍存的細(xì)胞具體過程

閱讀:1507          發(fā)布時(shí)間:2021-10-8

培養(yǎng)凍存的細(xì)胞具體過程:

(1) 將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,注意保護(hù)手和眼睛。

(2) 將凍存管快速的放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),直到管內(nèi)物體*融化。

(3) 將凍存管立即從水浴中拿出,擦干,轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。

(4) 用70%的酒精沖洗凍存管,然后擦去多余酒精。

(5) 打開蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋(注意,由于凍存管有負(fù)壓,開蓋時(shí)可能會(huì)有少量溢出,這是正常現(xiàn)象)。

(6) 用多聚賴氨酸(或參照說明書)包被培養(yǎng)瓶。多數(shù)細(xì)胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個(gè)細(xì)胞。

(7) 蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要?dú)怏w交換可打開蓋子。

(8) 將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)

(9) 放入培養(yǎng)箱后第6-16小時(shí)更換一次培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。



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