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技術文章

戴安離子色譜針對巴膽堿注射液含量及有關物質測定

閱讀:470          發布時間:2019-8-26

關鍵詞:離子色譜;電導;IonPac CS17;卡巴膽堿注射液;含量測定;有 關物質 

 

引言 
卡巴膽堿為M、N膽堿受體激動藥,是人工合成的擬膽堿藥,具有雙重縮 瞳作用,可直接作用瞳孔括約肌上的膽堿受體,即刻產生縮瞳效果; 同時有抗 膽堿酯酶作用,能維持長時間的縮瞳效果。 [1]
卡巴膽堿注射液為中國藥典收載品種,目前使用的含量測定方法為紫外 分光光度法,該方法需對卡巴膽堿衍生后才能測定,操作繁瑣,易引入誤 差。[2]本實驗使用離子色譜法對卡巴膽堿進行測定,靈敏度高,重現性好,且 該色譜條件可同時分離測定卡巴膽堿注射液中含有的雜質膽堿和乙酰膽堿。

 

 

測試條件
儀器:戴安ICS 5000離子色譜系統; 分析柱:IonPac CS17,7.0 µm,250×4 mm (P/N: 060557); 保護柱:IonPac CG17,7.0 µm,50×4 mm  (P/N: 060560); 柱溫:30 ℃; 淋洗液:5 mmol/L甲烷磺酸(MSA) 流速:1.00 mL/min; 定量環:20 µL 抑制器:CSRS 300 4 mm,自循環模式抑制

 

檢測方式:抑制型電導檢測,陽離子自動電解連續再 生微膜抑制器CSRS 300 4 mm(P/N: 064556),自循環 模式,抑制電流15 mA。

樣品前處理
取注射液直接進樣。

 

 

結果和討論
重現性、線性和靈敏度
取含卡巴膽堿100 mg/L、氯化膽堿和乙酰膽堿分別 為10 mg/L的標準溶液,連續進樣6次,峰面積、保留時 間、峰高的相對標準偏差(RSD)均低于3%。結果見 表1。
在本色譜條件下配制適宜濃度范圍的離子標準曲線, 卡巴膽堿在20~200 mg/L范圍內具有良好線性關系,其線 性相關系數r=0.9999;膽堿在2~20 mg/L范圍內具有良好 的線性關系,其線性相關系數分別為r=0.9999;氯化膽堿 在2~20 mg/L范圍內具有良好的線性關系,其線性相關系 數分別為r=0.9999。在本實驗條件下,氯化膽堿的檢出限 為5.6 µg/L,卡巴膽堿的檢出限為9.7 µg/L,乙酰膽堿的檢 出限為14.0 µg/L。

 

 

實際樣品分析及加標回收
取注射液10 mL,加入含卡巴膽堿100 mg/L、氯化膽 堿和乙酰膽堿分別為10 mg/L的標準溶液,混合,進行加 標回收實驗,三種離子加標回收率均在90~101%之間。 色譜圖如圖1所示。

 

 

結論
三種膽堿類化合物在本實驗條件下,可以被很好的 分離和測定。此方法不需衍生,操作簡單,且方法有很 好的特異性和重現性,結果可靠,可用于卡巴膽堿注射 液含量與有關物質的同時檢測。

 

 

 

 

 

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