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單細胞分選進行預處理的常見方法介紹
閱讀：212 發(fā)布時間：2023-9-28
如何使單細胞分選的結果更準確、更可靠？我們需要對樣品進行預處理。為什么需要對樣品進行預處理？常用的預處理方法又有哪些呢？
首先，我們需要了解為什么需要對樣品進行預處理。在生物樣本中，包括血液、組織、尿液等，通常存在著大量的細胞外基質（ECM）和非細胞成分。這些成分會對單細胞分選產(chǎn)生干擾，導致錯誤的分選結果。例如，紅細胞會與ECM發(fā)生粘附，使得它們難以被分離出來；而非細胞成分如蛋白質、糖類等也會與細胞發(fā)生相互作用，影響它們的形態(tài)和功能。因此，為了消除這些干擾因素，我們需要對樣品進行預處理。
接下來，我們將介紹一些常用的預處理方法。
1、細胞裂解：細胞裂解是一種常見的預處理方法，它可以破壞細胞之間的連接，使細胞分散開來。常用的細胞裂解方法有機械裂解、化學裂解和酶裂解。機械裂解是通過物理力量如剪切力來破壞細胞之間的連接；化學裂解則是通過加入特定的化學試劑來破壞細胞之間的連接；酶裂解則是通過使用特定的酶來分解細胞之間的連接。
2、離心：離心是將樣品通過高速旋轉來分離不同密度的成分的方法。在單細胞分選中，離心可以用來去除ECM和非細胞成分。通常，我們可以先用低速離心將大部分的ECM和其他非細胞成分分離出來，然后再用高速離心進一步去除。
3、免疫磁珠分選：免疫磁珠分選是一種基于抗原-抗體相互作用的分選方法。首先，我們使用特異性抗體標記目標細胞的表面抗原，然后將這些標記的細胞與未標記的ECM或其他非細胞成分混合在一起。接著，我們使用磁性珠子將標記的細胞與非標記的ECM或其他非細胞成分分離開來。這種方法具有高度的選擇性和敏感性，可以有效地從復雜的生物樣本中分離出目標細胞。
4、流式細胞術：流式細胞術是一種基于激光和電子技術的分選方法。它可以通過檢測目標細胞表面的特定分子或熒光蛋白來識別和分離目標細胞。流式細胞術具有高分辨率和靈敏度，可以同時分析大量細胞，因此在單細胞分選中得到了廣泛應用。
在單細胞分選過程中，樣品的預處理是非常重要的。通過選擇合適的預處理方法，我們可以有效地消除干擾因素，提高單細胞分選的準確性和可靠性。