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使用制備液相色譜有哪些技巧
制備色譜是以分離出純物質為目的的色譜系統，分析色譜是以分析出樣品組分信息為目的的色譜系統，基于他們目的的不同，制備色譜相對于分析色譜有很多不同特征，不能簡單等同。
使用制備液相色譜時有哪些技巧。
一、快速液相色譜純化
使用快速色譜法進行純化的缺點是該方法固有的分辨率較低。快速液相色譜柱使用更大的粒徑和柱容量，允許使用更多的起始材料，但以分辨率和純度為代價。如果化合物不需要更高的純度，或者如果下一步將進行 HPLC，這可能是您的選擇。
1、確定溶劑系統
樣品的純度(即混合物中有多少化合物)可以使用薄層色譜法 (TLC) 和組分的相對極性進行定性測定。使用 TLC 預先篩選最佳流動相和固定相將節省時間和金錢。根據所使用的溶劑，您可能需要在通風柜中運行色譜柱，因為存在潛在的危險煙霧。
2、確定要使用的列
選擇分離柱時要考慮樣品量。色譜柱裝載量因粒徑和體積而異。一般來說，快速液相色譜柱的最大裝載量約為硅膠重量的 10%。較大的色譜柱能夠處理千克數量的色譜柱，但如果您沒有那么多起始材料，那么您只會在硅膠和額外的溶劑上浪費金錢來運行這些大型色譜柱。在確定液相分析柱、基質和溶劑后，您就可以進行快速分離了。
3、液相色譜柱
無論您是自己裝柱還是購買一根預裝柱，按重量計算硅膠與化合物的比例(即硅膠：化合物)都將幫助您實現更有效的分離。
二、HPLC純化
在 HPLC 上運行樣品相當簡單，因為在快速液相色譜柱上預純化過程中確定的許多參數都可以應用于此過程。如果您在沒有預純化步驟的情況下運行 HPLC 分離，請考慮使用上面列出的指南來開發合適的 HPLC 方法。使用 HPLC 時的另一個考慮因素是計算的背壓。由于 HPLC 色譜柱的粒徑更小，可實現更高質量的分離，因此這些系統往往在高壓條件下運行，而閃蒸分離的壓力相對較低。使用有關粒徑和形狀、色譜柱內徑和溶劑規格的信息計算估計的背壓。