【產(chǎn)品名稱】沙門氏菌SPP-spyPCR試劑盒

【包裝規(guī)格】 50T/盒實(shí)時熒光PCR法

沙門氏菌SPP-spyPCR試劑盒適用于檢測，可用于臨床沙門氏菌SPP-spy感染的輔助診斷，但不作確診使用。

利用相應(yīng)儀器對 PCR 過程進(jìn)行實(shí)時監(jiān)測，實(shí)現(xiàn)檢測結(jié)果的定性分析，用于臨床上對可疑感染者的病原 學(xué)診斷。

反應(yīng)液、酶液、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品。

-20℃±5℃，避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過 5 次，有效期 12 個月。
ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測儀。上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長期保存可置-70℃，但不能超過 6 個月，標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸， 嚴(yán)禁反復(fù)凍融。

1

1.1樣本前處理 血液、體液和棉拭子樣本取 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中。 核酸提取 推薦采用核酸提qu或純化試劑（磁珠法或離心柱法）進(jìn)行核酸提qu， 請按照試劑說明書進(jìn)行操作。

試劑RP

將混合好的測試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中，21μL/管。

3.加樣（樣本處理區(qū)） 將步驟 1 提取的核酸、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μL，分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中，蓋好管蓋，混勻，短 暫離心。

4.1

4.2

4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：

2.結(jié)果分析判定 結(jié)果分析條件設(shè)定 設(shè)置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機(jī)器自動分析的結(jié)果分析，當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時，根據(jù)分析后圖像 調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值（一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)）、stop 值（一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)），以及 Threshold 的 Value 值（上下拖動閾值線至高于陰性對照），重新分析結(jié)果。結(jié)果判斷 陽性：檢測通道 Ct 值≤35，且曲線有明顯的指數(shù)增長曲線； 可疑：檢測通道 35值≤38，建議重復(fù)檢測，如果檢測通道仍為 35值≤38，且曲線有明顯的增長曲線， 判定為陽性，否則為陰性； 陰性：樣本檢測結(jié)果 Ct 值>38 或無 Ct 值。

4.檢測方法的局限性

2.樣本提取過程中沒有控制好交叉污染，會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；

4.病原體在流行過程中基因突變、重組，會導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

6.試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果；
7.本檢測結(jié)果僅供參考，如須確診請結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測手段。

1.所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行；

3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存；

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服；

7.實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺和移液器；