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詳細(xì)介紹
小鼠原代中耳上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
小鼠原代中耳上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持小鼠原代中耳上皮細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含小鼠原代中耳上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于小鼠原代中耳上皮細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分：
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清（FBS） | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗（P/S） | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；-20℃，避光，保存6個(gè)月。
1）復(fù)蘇小鼠原代中耳上皮細(xì)胞培養(yǎng)基：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查小鼠原代中耳上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2）細(xì)胞傳代：如果小鼠原代中耳上皮細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗小鼠原代中耳上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若小鼠原代中耳上皮細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待小鼠原代中耳上皮細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
HCT-15(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0394NCI-H2170(人肺鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B | 細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白抗體 |
蛋白激酶LYK5抗體 | Rho相關(guān)結(jié)構(gòu)域BTB蛋白質(zhì)1抗體 |
CD44V10抗體 | HHLA2蛋白抗體 |
殺菌/通透性增強(qiáng)蛋白抗體 | 嘌呤ATP受體抗體 |
可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SLC24A5抗體 | 酸化分化相關(guān)基因NDRG1抗體 |
整合素α4抗體 | 豬腎傳代細(xì)胞;IBRS-2 |
Hut-78細(xì)胞，皮膚T細(xì)胞淋巴瘤 人血管平滑肌,T/G細(xì)胞 人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞;OCM-1A | NA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 酶 (Neuraminidase / NA) (N295S mutation) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
酸化α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 | SW-13(人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 MCF-7(人癌細(xì)胞) |
糖蛋白gp330抗體 | SELE Others Human 人 E-Selectin / CD62E 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3-VP16-TNFa | EFNB2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標(biāo)簽) |
0脂酰基醇蛋白聚糖-4抗體 | 高背鯽魚尾鰭細(xì)胞;GBJd |
酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子抗體 | 小鼠原代中耳上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM933 人髂動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
AML-193(人急性單核細(xì)胞白血病單核細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人細(xì)胞HN | ACPP Others Mouse 小鼠 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
小鼠腹水瘤細(xì)胞;S-180 小鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL | CM-M095小鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
1.使用小鼠原代中耳上皮細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作，避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗，如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗，可以直接使用。
3.為保持本小鼠原代中耳上皮細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果，不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用，超出保質(zhì)期，必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用，不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后，可能會(huì)有少量絮狀物析出，不影響小鼠原代中耳上皮細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。
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