詳細介紹
人原代椎體終板軟骨細胞專用培養(yǎng)基
人原代椎體終板軟骨細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人原代椎體終板軟骨細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含人原代椎體終板軟骨細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人原代椎體終板軟骨細胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代軟骨細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代軟骨細胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;-20℃,避光,保存6個月。
1)復(fù)蘇人原代椎體終板軟骨細胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查人原代椎體終板軟骨細胞培養(yǎng)基密度。
2)細胞傳代:如果人原代椎體終板軟骨細胞培養(yǎng)基密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗人原代椎體終板軟骨細胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若人原代椎體終板軟骨細胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待人原代椎體終板軟骨細胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMYB 人椎間盤髓核細胞培養(yǎng)基 100mL | Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Avidin 兔抗親和素 規(guī)格 1mg |
t-PA ELISA Kit 大鼠組織型纖溶酶原激活劑 96T | RRAS2: 畸胎瘤癌基因RAS相關(guān)病毒抗體 0.2ml |
Anti-FOXF1/FITC 熒光素標(biāo)記叉頭蛋白F1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | Phospho-MAP3K8 (Ser400): 0酸化原活化蛋白激酶激酶8抗體 0.1ml |
鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(包被) Anti-CEA 0.1ml | Anti-Phospho-CRMP-2 (Thr514) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠0酸化二氫嘧啶酶樣2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml |
MAL: MAL蛋白抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLHL7 kelch樣蛋白7抗體 規(guī)格 0.2ml |
HK ELISA Kit 大鼠己糖激酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T | 人腎癌Wilms細胞;G401 |
293 Ad5+細胞,人原胚腎轉(zhuǎn)化細胞系 大鼠肝癌細胞,H4-ⅡE細胞 CL-0316A7r5(大鼠胸大動脈平滑肌細胞)5×106cells/瓶×2 | DPP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Goat Anti-human Fibrinogen/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗Multi-class antibodies規(guī)格: 0.3ml | KP-N-NS(人腎上腺母細胞瘤細胞(腦轉(zhuǎn)移)) 5×106cells/瓶×2 破傷風(fēng)桿菌/梭菌Closidium tetani |
OGFOD1: 末端多聚腺苷酸1蛋白抗體 0.2ml | BCAM Others Human 人 BCAM 人細胞裂解液 (陽性對照) |
FibroFectagen? 成纖維細胞轉(zhuǎn)染試劑盒 | 大鼠癌細胞;SHZ-88 |
Anti-Caspase-9/FITC 熒光素標(biāo)記白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml | 大鼠心肌細胞RCM |
Rabbit Anti-IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.3ml | 人原代椎體終板軟骨細胞專用培養(yǎng)基SERPINA11 Others Mouse 小鼠 SERPINA11 / Serpina11 人細胞裂解液 (陽性對照) |
T Others Human 人 ansthyretin / T / Prealbumin / PALB 人細胞裂解液 (陽性對照) | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SW620人結(jié)腸癌細胞 SW620 human colon cancer cells L-15+10%FBS | 倉鼠腎細胞;HL-1 |
1.使用人原代椎體終板軟骨細胞培養(yǎng)基時應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本人原代椎體終板軟骨細胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會有少量絮狀物析出,不影響人原代椎體終板軟骨細胞培養(yǎng)基正常使用。