詳細(xì)介紹
小鼠原代腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基
小鼠原代腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠原代腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含小鼠原代腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠原代腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇小鼠原代腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查小鼠原代腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果小鼠原代腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗小鼠原代腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若小鼠原代腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待小鼠原代腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
HT-29人結(jié)腸癌細(xì)胞 HT-29 human colon cancer cells McCoy's 5a+10%FBS | 細(xì)胞毒性受體NK-p80抗體 |
酯酶抑制劑8抗體 | RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 |
CD33L抗體 | 乙酰化組蛋白H4(K16)抗體 |
巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白12抗體 | 牛磺酸/β-氨基乙磺酸抗體 |
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白94抗體 | 核孔蛋白1抗體 |
白介素1受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白抗體 | 細(xì)胞培養(yǎng)基NM |
LS 174T人結(jié)腸腺癌細(xì)胞 LS 174T human colon adenocarcinoma cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS | RAG(小鼠腎腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 H08910(卵巢癌細(xì)胞) |
20號(hào)染色體開放閱讀框94抗體 | TNFRSF10B Others Mouse 小鼠 AILR2 / TNFRSF10B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
淋巴細(xì)胞0蛋白酸酶相關(guān)蛋白抗體 | DPP4 Others Human 人 DPPIV 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
HA(人羊膜細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 | CNE(人鼻咽癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
酸化組蛋白去乙酰化酶4抗體 | HL-60, 人早幼粒白血病細(xì)胞 |
原活化蛋白激酶酸酶-2抗體 | 小鼠原代腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基GH3(大鼠垂體瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠背脊髓元MN-dsc |
大鼠纖維母細(xì)胞;1/EJ 1-1 胃癌細(xì)胞,MGC80-3細(xì)胞 L-MTK細(xì)胞,鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞株 | HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) |
IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) | CM-R073大鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
1.使用小鼠原代腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本小鼠原代腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長(zhǎng)時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請(qǐng)于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響小鼠原代腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。