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EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM0501培養

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更新時間:2018-04-18 13:20:23瀏覽次數:377

聯系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM0501培養只能用于科研,不得用于臨床。應用公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株。細胞狀態良好,飽滿,光澤度好,*,專業技術指導。歡迎廣大科研用戶!

詳細介紹

細胞名稱  EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM0501培養
形態特性 淋巴母細胞樣

品牌 懸浮生長

特征特性 該細胞來源于一正常男性的外周血。2005年由中國科學院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。

培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS

傳代方法 1:

2傳代;5-6天一次  

傳代情況 P7

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 

支原體檢測 熒光法(-) 

STR Amelogenin:XY;D8S1179:14,16;D21S11:30,33.2;D7S820:11,12;CSF1PO:10;D3S1358:17;TH01:7, 9;D13S317:8,12;D16S539: 11,12;D2S1338:,17,20;D19S433:13,14;vWA:19;THOX:8;D18S51:14,15;D5S818:10,11 ;FGA:24。

同工酶

染色體

使用權限 A類

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM0501培養操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Anti-ZW10 peptide/FITC 熒光素標記著絲粒蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

DCC (Deleted in colorectal cancer gene) 結直腸癌缺失基因抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg

膜粘連蛋白 Ⅳ抗體 Anti-Annexin Ⅳ 0.1ml

ZBTB5 英文名稱: 鋅指蛋白ZBTB5抗體 0.2ml

Dact2 英文名稱: Dapper2蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ERK1+ERK2(Thr185+Tyr187+Thr202+Tyr204) 磷酸化原活化蛋白激酶ERK抗體 規格 0.1ml

DCC (Deleted in colorectal cancer gene) 結直腸癌缺失基因抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
u-T4 ELISA Kit 大鼠高敏甲狀腺素Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-ULBP3/N2DL3 UL16結合蛋白3抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh GCET1 B淋巴細胞生發中心相關蛋白抗體 規格 0.2ml

CXCL16 ELISA Kit 大鼠CXC趨化因子配體16 96T

phospho-NFATc2(Ser330) 英文名稱: 磷酸化核因子活化T細胞胞漿蛋白2抗體 0.1ml

ADCY10 英文名稱: 腺苷酸環化酶10抗體 0.2ml

Anti-ULBP3/N2DL3 UL16結合蛋白3抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
人二氫喋啶還原酶(DHPR)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒,英文名:Col Ⅰ ELISA KiISA Kit for Human Induced myeloid leukemia cell differentiation protein Mcl-1大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒,英文名:gp130 ELISA Kit人粘蛋白2(MUC2)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠前列腺素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒,英文名:PGF2α ELISA KiISA Kit for Human NADPH oxidase 1大鼠淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒,英文名:Lptn/LTN/XCL1 ELISA Kit人腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒,英文名:T4 ELISA KiISA Kit for Progesterone大鼠骨保護素(OPG)ELISA試劑盒,英文名:OPG ELISA Kit人增殖細胞核抗原相關因子(PCNA-associated factor)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL大鼠膽囊收素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒,英文名:CCK ELISA Kit

人鋅轉運蛋白3(ZnT-3)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠胰島素樣蛋白3(INSL3)ELISA試劑盒,英文名:INSL3 ELISA KiISA Kit for Human POU domain, class 5, transcription factor 1大鼠白介素26(IL-26)ELISA試劑盒,英文名:IL-26 ELISA Kit人血小板衍生生長因子C(PDGF)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠KiSS-1受體(KISS1R)ELISA試劑盒,英文名:KISS1R ELISA KiISA Kit for Human Regucalcin大鼠活化素A(Activin-A)ELISA試劑盒,英文名:Activin-A ELISA Kit人絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SIK1(Serine/threonine-protein kinase SIK1)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠乙醇脫氫酶1(ADH1)ELISA試劑盒,英文名:ADH1 ELISA KiISA Kit for Human Somatostatin receptor type 2大鼠戊糖素(PTD)ELISA試劑盒,英文名:PTD ELISA Kit人α突觸核蛋白(Alpha-synuclein)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL大鼠神經激肽B(NKB)ELISA試劑盒,英文名:NKB ELISA Kit
山羊抗大鼠 IgM/HRP 0.1ml 美國Jackson公司分裝

VWF 英文名稱: 血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-ATG9A(Ser735) 磷酸化自噬相關蛋白9A抗體 規格 0.1ml

Nogo-B/A 軸索過度生長抑制因子-B/A抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg

Delta Opioid Receptor 英文名稱: D型受體抗體 0.1ml

anti-AQP1 水通道蛋白1抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Human Complement fragment 3a,C3a ELISA Kit 人補體片斷3aMulti-class antibodies規格: 48T

Anti-RNF126 環指蛋白126抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh GstP1/GST class-pi 谷胱甘肽硫轉移酶pi基因抗體 規格 0.1ml

8-iso-PG(Mouse 8-iso prostaglandin) ELISA Kit 小鼠8異前列腺素 96T

Oncomodulin 英文名稱: 癌調蛋白/癌鈣蛋白抗體 0.2ml

Bad 英文名稱: 相關死亡促進因子Bad抗體 0.1ml

Anti-RNF126 環指蛋白126抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml

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