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人胚肺成纖維細胞;HFL1培養

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更新時間:2025-04-09 16:06:07瀏覽次數:410

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產品簡介

應用領域 化工    
人胚肺成纖維細胞;HFL1培養只能用于科研,不得用于臨床。應用公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株。細胞狀態良好,飽滿,光澤度好,*,專業技術指導。歡迎廣大科研用戶!

詳細介紹

細胞名稱  人胚肺成纖維細胞;HFL1培養
形態特性 成纖維細胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細胞為穩定二倍體細胞。

培養條件 F12K 10%FBS

傳代方法 1:4-1:6,每周換液2-3次

傳代情況 P16

凍存條件 90%FBS+10%DMSO

支原體檢測

STR Amelogenin:X;CSF1PO:10;D13S317:8;D16S539:9,11;D18S51:15;D21S11:31.2,32.2;D3S1358:15,17;D5S818:11,12;D7S820:11;D8S1179:12,14;FGA:21,24;PentaD:9,14;PentaE:21;TH01:6,9;TPOX:8;vWA:16

同工酶

染色體

使用權限 A類

人胚肺成纖維細胞;HFL1培養貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。

操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線

豬胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)免疫試劑盒phospho-APG4B(Ser309)

豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)免疫試劑盒AFAP

豬胰島素樣生長因子1(IGF-1)免疫試劑盒ADORA1

豬胰島素(INS)免疫試劑盒ARSB

豬一氧化氮(NO)免疫試劑盒A2BP1

豬氧還原蛋白過氧化物酶2(PRDX2)免疫試劑盒ADAM17

豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫試劑盒ARNT2 

豬血小板衍生生長因子(PDGF)免疫試劑盒ABH8

豬血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒ABI3BP

豬血纖蛋白原降解產物(FDP)免疫試劑盒ARHGAP20

豬血栓素A2(TXA2)免疫試劑盒ASB10

豬血栓調節蛋白(TM)免疫試劑盒ALDH1L1

豬血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒Axin 2

豬血紅蛋白(Hb)免疫試劑盒AMH

豬血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)免疫試劑盒EphA8

豬血管舒緩激肽(BK)免疫試劑盒Acetoacetyl-CoA synthetase

豬血管生成素2(ANG-2)免疫試劑盒ARNTL2

豬血管生成素1(ANG-1)免疫試劑盒phospho-AANAT (Thr29)


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