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雙酚A(BPA)elisa試劑盒實驗操作注意事項
閱讀:17 發(fā)布時間:2025-7-25雙酚A(BPA)elisa試劑盒實驗操作注意事項在實驗過程中,需特別注意以下操作細節(jié)以確保檢測結果的準確性:
1. 標準品稀釋與加樣
標準品需嚴格按照說明書梯度稀釋,避免反復凍融導致效價降低。加樣時槍頭避免觸碰微孔板內壁,防止交叉污染。建議設置復孔以減少偶然誤差。
2. 溫育條件控制
酶標板覆膜后需確保溫育環(huán)境均勻,避免因溫度波動影響抗原抗體結合。若使用水浴溫育,需防止冷凝水滲入孔內導致濃度偏差。
3. 洗板操作規(guī)范
手動洗板時需拍干液體,但避免過度用力導致包被抗原脫落。自動洗板機需提前校準注液量,確保每孔洗滌液充盈一致。殘留洗滌液可能干擾OD值讀數。
4. 顯色與終止時機
TMB顯色時間應嚴格控制在說明書范圍內,顯色過深可能導致標準曲線高值區(qū)線性不佳。終止液加入后須在10分鐘內完成檢測,避免顏色衰退。
5. 數據記錄與質控
每批次實驗需同步檢測空白孔、陰性對照及質控品。若CV值>15%,需排查加樣誤差或試劑失效可能。建議保存原始酶標儀讀數截圖以備復核。
注意事項延伸:
- 樣本預處理時,含脂質較多的血清需離心去除懸浮顆粒;
- 試劑盒從冷藏取出后需平衡至室溫再使用,低溫可能影響酶活性;
- 不同批號試劑組分不可混用,避免校準曲線偏移。
通過規(guī)范操作與細節(jié)管控,可顯著提升BPA檢測的重復性與靈敏度,為環(huán)境或生物樣本中的痕量分析提供可靠依據。
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