1.產品名稱：小鼠血管外膜成纖維細胞
2.組織來源：血管組織
3.產品規格：5×10^5cells/T25細胞培養瓶
4.細胞簡介：
小鼠血管外膜成纖維細胞分離自血管外膜組織；血管外膜是由疏松結締組織組成，其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結締組織細胞以成纖維細胞為主，當血管受損傷時，成纖維細胞具有修復外膜的能力。有的動脈中膜和外膜的交界處，有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁*，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細胞是血管外膜的主要組成細胞之一，其主要生理功能合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。
本公司生產的采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養基信息：
DMEM[H]、FBS、成纖維細胞生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養基（產品貨號：CM-M077）作為體外培養的培養基。

三、使用方法
在技術部標準操作流程下，小鼠肺微血管內皮細胞可傳3-5代；建議您收到
細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽
和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25細胞培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養瓶中，輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培
養瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待
細胞回縮變圓后，再加入5ml*培養基終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*
培養基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
四、注意事項
1. 培養基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和
技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時
和我們，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問
題得到解決。
5. 只可用于科研。

備注：由于實驗所用試劑、操作環境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考