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Biogradetech血漿/血清外泌體提取試劑盒解決方案

時間:2023/12/12閱讀:212
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Exosome(外泌體)是由活細胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡,具有典型的脂質雙分子層結構;存在于細胞培養上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中;Exosome攜帶有多種蛋白質、脂類、DNA和RNA等重要信息,不僅在細胞與細胞間的物質和信息傳遞中起重要作用,更有望成為多種疾病的早期診斷標志物。


 


本試劑盒基于自主研發的磁珠,可在不吸附雜質的情況下特異性捕獲外泌體,實現外泌體分離的高純度和高回收率。它具有操作簡單、純度高、回收率高的優點,特別適合于從血漿和血清中分離外泌體。隔離的外泌體可用于WB分析、NTA或納米流粒度分析、電子顯微鏡檢測、組學研究、細胞和動物功能研究等等。


 


艾美捷血漿/血清外泌體提取試劑盒:


目錄號:A-EXO006


尺寸:50T


儲存:收到后,按照儲存說明儲存套件組件。保質期為12月。


 


血漿/血清外泌體提取試劑盒組成:


套件組件尺寸               規格(50T)            儲存條件


ExoMag Exosome珠子        500 mg                  4℃


洗脫緩沖液                 5 mL                   室溫


溶液A                     2x125 mL                4℃


 

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樣品預處理:


1. 細胞去除:將樣品在4℃下以300 g的速度離心5分鐘,將上清液轉移到一個新的離心管中。對于無細胞的樣品,可以跳過這一步驟。


2. 細胞和細胞碎片去除:將樣品在4℃下以2000 g的速度離心10分鐘,將上清液轉移到一個新的離心管中。


3. 大顆粒物去除:將從步驟2獲得的上清液在4℃下以14000 g的速度離心30分鐘,將上清液轉移到一個新的離心管中。


 


富集外泌體:


1. 取500 μL預處理后的樣品(如果處理的樣品體積低于500 μL,只需使用溶液A將樣品體積補至500 μL),加入10 mg(±10%變異)的ExoMag外泌體磁珠到一個1.5 mL的離心管中。將離心管固定在平臺搖床上,在室溫下以17 rpm的速度孵育30分鐘。


2. 將上述離心管放在磁分離架上,靜置5秒鐘,倒掉上清液。


3. 加入1 mL溶液A,通過倒置離心管混合,將其放在磁分離架上靜置5秒鐘,倒掉上清液。


4. 重復步驟3兩次,保留ExoMag外泌體磁珠。


 


分離外泌體:


1. 向ExoMag外泌體磁珠中加入100 μL洗脫緩沖液,渦旋30秒鐘。將離心管固定在平臺搖床上,在室溫下以17 rpm的速度孵育30分鐘。


2. 將離心管放在磁分離架上,靜置5秒鐘,將上清液轉移到一個新的1.5 mL離心管中。這個上清液中含有外泌體。


外泌體不應長時間存放在洗脫緩沖液中。如果需要長期存儲,請使用超濾管(分子量截留率10 kDa)用PBS溶液替換洗脫緩沖液。


 


注意事項:


1、使用前請將外泌體抽提試劑(41202-A)充分混勻。


2、產品只針對血清/血漿樣本,不適用其它體液或者是細胞培養上清中外泌體的抽提;如果需要進行細胞上清外泌體分離,請選用細胞培養上清外泌體快速抽提試劑盒。


3、如果想要進一步純化外泌體,可以使用相應抗體包被的磁珠進行親和純化。


4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


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