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武漢艾美捷科技有限公司
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Biogradetech改良Masson三色染色液染色程序說明

時間:2023/11/6閱讀:214
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在狹義上,結締組織是指它所包含的三種纖維:膠原纖維、網狀纖維和彈性纖維,其中膠原纖維分布極為廣、含量極為豐富。Masson三色染色被稱為Masson染色法,是結締組織染色特別經-典的方法之一,也是膠原纖維染色的經典技術。術語“三色染色"通常是指對細胞進行染色細胞核,并選擇性地顯示膠原纖維和肌肉纖維。這種方法的染色原理與陰離子染料分子的大小和組織滲透性:較小的分子可以很容易地滲透致密和低滲透性組織,而較大的分子只能進入結構松散和高滲透性組織。然而,苯胺藍分子量大,因此Masson染色后,肌肉纖維呈現紅色,膠原蛋白纖維呈現綠色(淺綠色)或藍色(苯胺藍)。

 

艾美捷改良Masson三色染色液基本參數:

目錄號:A-CSH274

規格8×50mL

儲存:在2~8°C的黑暗中儲存(12個月)

 

程序:

1.將組織固定在10%福爾馬林固定劑中,然后常規脫水和包埋。切片被切割成4μm的厚度,然后進行常規的脫蠟直至脫水。

2.將切片置于Bouin溶液中,在室溫下孵育過夜或置于37°C的培養箱中孵育2小時進行媒介化。然后,用自來水沖洗切片,直到切片上的黃色消失。

3.切片用天青石藍染色溶液染色2-3分鐘,然后進行短暫的水洗。

4.切片用Mayer蘇木精染色溶液染色2-3分鐘,然后進行短暫的水洗。

5.切片在酸-醇分化溶液中分化幾秒鐘,然后用水沖洗10分鐘

6.切片用胭脂紅染色液染色10分鐘,然后用蒸餾水漂洗。

7.將切片用磷鉬酸水合物溶液處理約10分鐘。

8.倒出上清液,在不用水沖洗的情況下,將切片直接用苯胺藍染色溶液染色5分鐘。

9.將切片用弱酸溶液處理2分鐘。

10.使用95%乙醇進行快速脫水。切片在100%乙醇中脫水三次,每次5-10秒。

11.切片在二甲苯中清洗三次,每次清洗1-2分鐘。最后,使用中性安裝介質進行密封

 

改良Masson三色染色液供應材料和儲存條件

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注:

1.應盡可能徹-底地對各部分進行除石蠟處理。酸性醇的分化時間應根據切片的厚度、組織類型及其年齡來確定。

2.磷鉬酸的作用有兩個:一方面,它將染紅的膠原纖維區分為無色或淡紅色,同時使肌肉纖維和纖維素仍呈現鮮紅色;另一方面,它作為膠原纖維的媒染劑,促進它們與苯胺藍染色溶液的結合。

3.苯胺藍染色后用弱酸溶液處理,目的是去除細胞質中的藍色,使染色生動清晰。對于用Zenker溶液固定的組織,弱酸溶液的處理時間可以延長到5分鐘。

4.弱酸性溶液可提高色彩的清晰度和生動性。如果需要大量,可以制備0.1-0.3%的乙酸溶液作為替代品。

 

該試劑僅用于科學研究領域,不適用于臨床診斷或其他用途。


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