Cas9核酸酶（CRISPR相關蛋白9）是一種RNA引導的核酸內切酶，用于通過產生序列特異性雙鏈斷裂（DSB）進行基因組編輯。DNA中DSB的存在導致細胞修復過程的激活，其中DNA恢復通過非同源末端連接（NHEJ）或同源定向重組（HDR）發(fā)生，從而改變基因組。基因敲低、缺失或插入說明了CRISPR/Cas9系統(tǒng)的主要成就。

艾美捷OZ Biosciences 優(yōu)化的Cas9核酸酶化膿性鏈球菌設計用于活細胞或生物體的基因組編輯以及體外消化。

使用 Cas9/RNP 遞送提高基因組編輯效率 成功的 CRISPR/Cas9 基因組編輯可以通過多種方法（質粒、mRNA、核酸酶、病毒遞送）進行。

為什么選擇Cas9蛋白而不是Cas9 DNA或mRNA？

Cas 9重組蛋白比核酸遞送速度更快，一旦進入細胞內就完-全活躍，沒有潛伏期（與核酸所需的轉錄和翻譯機器相反）。

這些特性使核酸酶蛋白遞送特別適用于精密基因組工程。

圖1：用sgRNA編程的Cas9核酸酶。結合后，短向導RNA（sgRNA）特異性靶向短DNA序列標簽（PAM）。Cas9核酸酶在PAM序列上游切割DNA三個核苷酸。

高效的核酸遞送是基因組編輯實驗的關鍵步驟。 為了獲得優(yōu)化的Cas9核酸酶遞送，建議親交付 CRISPR轉染試劑。

規(guī)格：

CAS9050： 50 μg Cas9 核酸酶在 50 μL 中

CAS9100： 100 μg Cas9 核酸酶在 100 μL 中

CAS9500： 500 μg （5x100 μg） Cas9 核酸酶，500μL （5x100 μL）

提供的試劑：Cas9反應緩沖液（10X）

推薦用于 CRISPR Cas9 基因組編輯實驗。

優(yōu)化的Cas9核酸酶化膿性鏈球菌設計用于活細胞或生物體的基因組編輯以及體外消化。

使用Pro-DeliverIN CRISPR在細胞中進行基因組編輯

Cas9核酸酶可以直接遞送到培養(yǎng)物或生物體中的活細胞中，使用ProDeliverIN CRISPR（# PIC60100 或 #PIC60500）。以下方案是在24孔板中進行基因組編輯的示例：

制備 1 μg Cas9 核酸酶和 250 ng sgRNA 的混合物上下移液輕輕混合

在室溫（推薦 10°C）下孵育 25 分鐘以形成 Cas9/RNP 復合物直接加入 2 μL ProDeliverIN CRISPR

在室溫（推薦 20°C）下孵育 25 分鐘以形成復合物用完整的培養(yǎng)基補充 50 μL

將復合物滴加到細胞上，并在標準培養(yǎng)條件下孵育。