美國 Zeta life-Advanced RNA 轉染試劑 2025 年全新升級
產品概述
Advanced RNA 轉染試劑，產品貨號為 AD300025，以下是其詳細的操作說明書。
一、試劑盒組分
Advanced RNA 轉染試劑：貨號 AD30，是實現高效 RNA 轉染的關鍵成分。
稀釋液：貨號 X-DS，用于稀釋轉染試劑，以確保其在轉染過程中發揮最佳性能。
二、注意事項
培養基使用：轉染復合物可直接轉入含有血清的培養基中進行轉染操作。轉染 24 小時后需更換培養基，48 小時后收集細胞用于后續實驗。特別注意，轉染所用的含血清培養基中不應含有雙抗，以免影響轉染效果。
siRNA 純度：使用高純度的 siRNA 對提高轉染效率至關重要。高純度的 siRNA 能夠減少雜質干擾，確保轉染過程順利進行。
試劑用量：建議轉染試劑的用量為 0.1 μL/pmol siRNA，以達到理想的轉染效果。
siRNA 濃度：siRNA 的實驗濃度推薦為 40 nM，在此濃度下能夠有效實現基因沉默等實驗目的。
儲存條件：本產品應儲存于 4°C 環境中，嚴禁凍融，以保證其活性和穩定性。產品的有效期為 1 年，請在有效期內使用。
三、簡易操作說明
核酸準備要求：實驗中使用的 RNA 濃度需達到 20 uM /L，確保 RNA 質量和濃度符合實驗要求。
操作流程
細胞接種：提前 1 天進行細胞接種，確保在轉染時細胞的匯合度達到 70-90%，為轉染提供良好的細胞狀態。
稀釋轉染試劑：根據參考用量，使用稀釋液（貨號 X-DS）對 Advanced RNA® 轉染試劑進行稀釋，確保轉染試劑的濃度合適。
加入 siRNA 溶液：向稀釋后的轉染試劑中加入 siRNA 溶液，并充分混勻，使轉染試劑與 siRNA 充分結合。
孵育形成復合物：將 siRNA 與轉染試劑的混合液在室溫下孵育 20-30 分鐘，形成穩定的轉染復合物。若希望達到更佳的轉染效果，也可在 37℃下進行孵育。
加入復合物到細胞中：根據參考用量，將孵育好的復合物加入到細胞中，確保復合物能夠有效進入細胞。
結果分析：細胞繼續培養 2-3 天后，對轉染效果進行檢測和分析，評估轉染的效率和效果。
四、以細胞培養板為例的轉染試劑及 RNA 用量梯度說明
培養器皿 | siRNA 濃度 | 每孔體積 | 轉染試劑 | 轉染試劑稀釋液 | 20μM siRNA | 培養基 |
96-well | 100 nM | 100 μL | 1 μL | 10 μL | 0.5 μL | 88.5 μL |
96-well | 40 nM | 100 μL | 0.4 μL | 10 μL | 0.2 μL | 89.4 μL |
96-well | 20 nM | 100 μL | 0.2 μL | 10 μL | 0.1 μL | 89.7 μL |
96-well | 10 nM | 100 μL | 0.1 μL | 10 μL | 0.05 μL | 89.85 μL |
24-well | 100 nM | 500 μL | 5 μL | 50 μL | 2.5 μL | 442.5 μL |
24-well | 40 nM | 500 μL | 2 μL | 50 μL | 1 μL | 447 μL |
24-well | 20 nM | 500 μL | 1 μL | 50 μL | 0.5 μL | 448.5 μL |
24-well | 10 nM | 500 μL | 0.5 μL | 50 μL | 0.25 μL | 449.25 μL |
12-well | 100 nM | 1 mL | 10 μL | 100 μL | 5 μL | 885 μL |
12-well | 40 nM | 1 mL | 4 μL | 100 μL | 2 μL | 894 μL |
12-well | 20 nM | 1 mL | 2 μL | 100 μL | 1 μL | 897 μL |
12-well | 10 nM | 1 mL | 1 μL | 100 μL | 0.5 μL | 898.5 μL |
6-well | 100 nM | 2 mL | 20 μL | 200 μL | 10 μL | 1770 μL |
6-well | 40 nM | 2 mL | 8 μL | 200 μL | 4 μL | 1788 μL |
6-well | 20 nM | 2 mL | 4 μL | 200 μL | 2 μL | 1794 μL |
6-well | 10 nM | 2 mL | 2 μL | 200 μL | 1 μL | 1797 μL |
本產品僅用于科研用途，嚴禁用于臨床診斷或治療等其他用途。
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