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技術(shù)文章

分光光度計(jì)的基本知識(shí)介紹

閱讀:2126          發(fā)布時(shí)間:2021-7-29

分光光度計(jì)的基本工作原理是基于物質(zhì)對(duì)光(對(duì)光的波長(zhǎng))的吸收具有選擇性,不同的物質(zhì)都有各自的吸收光帶,所以,當(dāng)光色散后的光譜通過(guò)某一溶液時(shí),其中某些波長(zhǎng)的光線就會(huì)被溶液吸收。在一定的波長(zhǎng)下,溶液中物質(zhì)的濃度與光能量減弱的程度有一定的比例關(guān)系,即符合比爾定律。  
  分光光度計(jì)的構(gòu)造
  
  分光光度計(jì)允許的測(cè)定波長(zhǎng)范圍在360~800nm,其構(gòu)造比較簡(jiǎn)單,測(cè)定的靈敏度和精密度較高。因此,應(yīng)用比較廣泛。721型分光光度計(jì)的儀器構(gòu)造見下圖。
  
  從光源燈發(fā)出的連續(xù)輻射光線,射到聚光透鏡上,會(huì)聚后,再經(jīng)過(guò)平面鏡轉(zhuǎn)角90°,反射至入射狹縫。由此入射到單色器內(nèi),狹縫正好位于球面準(zhǔn)直物鏡的焦面上,當(dāng)入射光線經(jīng)過(guò)準(zhǔn)直物鏡反射后,就以一束平行光射向棱鏡。光線進(jìn)入棱鏡后,進(jìn)行色散。色散后回來(lái)的光線,再經(jīng)過(guò)準(zhǔn)直鏡反射,就會(huì)聚在出光狹縫上,再通過(guò)聚光鏡后進(jìn)入比色皿,光線一部分被吸收,透過(guò)的光進(jìn)入光電管,產(chǎn)生相應(yīng)的光電流,經(jīng)放大后在微安表上讀出。
  
  分光光度計(jì)的使用方法
  
  ①首先接通電源,打開電源開關(guān)1,指示燈亮,打開比色皿暗箱蓋8,預(yù)熱20分鐘。
  
  ②波長(zhǎng)選擇旋鈕6,選擇所需的單色光波長(zhǎng),用靈敏度旋鈕2選擇所需的靈敏檔。
  
  ③放入比色皿,旋轉(zhuǎn)零位旋鈕5調(diào)零,將比色皿暗箱蓋合上,推進(jìn)比色皿拉桿3,使參比比色皿處于空白校正位置,使光電管見光,旋轉(zhuǎn)透光率調(diào)節(jié)旋鈕4,使微安表9指針準(zhǔn)確處于。按上述方法連續(xù)幾次調(diào)整零位和位,即可進(jìn)行測(cè)定工作。
  
  分光光度計(jì)使用和維護(hù)中應(yīng)注意事項(xiàng):
  
  ①連續(xù)使用儀器的時(shí)間不應(yīng)超過(guò)2小時(shí),是間歇0.5小時(shí)后,再繼續(xù)使用。
  
  ②比色皿每次使用完畢后,要用去離子水洗凈并倒置晾干后,存放在比色皿盒內(nèi)。在日常使用中應(yīng)注意保護(hù)比色皿的透光面,使其不受損壞或產(chǎn)生劃痕,以免影響透光率。
  
  ③儀器不能受潮。在日常使用中,應(yīng)經(jīng)常注意單色器上的防潮硅膠(在儀器的底部)是否變色,如硅膠的顏色已變紅,應(yīng)立即取出烘干或更換。
  
  ④在托運(yùn)或移動(dòng)儀器時(shí),應(yīng)注意小心輕放。

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