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New Phytol于彥春/武麗敏:NMT發(fā)現(xiàn)KAR酶失活致熱激后

閱讀:798        發(fā)布時間:2021-9-14

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基本信息

主題:NMT發(fā)現(xiàn)KAR酶失活致熱激后葉肉吸Ca失調(diào)為KAR酶通過調(diào)節(jié)脅迫信號賦予水稻耐熱性提供證據(jù)

期刊:New Phytologist

影響因子:8.512

研究使用平臺NMT溫度脅迫創(chuàng)新平臺

標題:A β-Ketoacyl carrier protein reductase confers heat tolerance via the regulation of fatty acid biosynthesis and stress signaling in rice

者:杭州師范大學武麗敏、于彥春、陳飛,西悉尼大學陳仲華,中國水稻研究所Guojun Dong


檢測離子/分子指標

Ca2+


檢測樣品

水稻葉肉細胞





中文摘要


熱脅迫是影響作物生長和生產(chǎn)力的重大環(huán)境威脅。然而,與植物對熱脅迫響應相關的分子機制還不清楚。在此,本研究鑒定了一個水稻熱脅迫敏感突變體hts1HTS1編碼一種類囊體膜定位的β-酮脂酰載體蛋白還原酶(β-ketoacyl carrier proteinreductase,KAR)參與de novo脂肪酸生物合成。系統(tǒng)發(fā)育和生物信息學分析表明,HTS1可能起源于輪藻,在陸生植物中進化保守。熱穩(wěn)定的HTS1主要在綠色組織中表達,受熱脅迫誘導強烈,但對鹽度、低溫和干旱處理的響應較弱。HTS1中A254T的氨基酸置換導致KAR酶活性顯著下降,從而影響hts1突變體的脂肪酸合成和脂質(zhì)代謝,尤其是在熱脅迫下。與野生型相比,熱誘導下,hts1表現(xiàn)出更高H2O2積累,更大的葉肉細胞Ca2+內(nèi)流,對膜和葉綠體的傷害更大。同時,hts1突變體中熱應激信號的中斷抑制了HsfA2s和下游靶基因的轉(zhuǎn)錄激活。研究認為HTS1在水稻耐熱脅迫過程中對膜穩(wěn)定性、葉綠體完整性和脅迫信號傳導至關重要





離子/分子流實驗處理


45℃高溫實時處理





離子/分子流實驗結果

質(zhì)膜對于植物熱感應、細胞響應和Ca2+信號轉(zhuǎn)導至關重要。因此,本研究檢測了熱脅迫誘導的葉肉細胞Ca2+內(nèi)流。熱處理10 min,hts1突變體葉肉細胞的熱誘導瞬時凈Ca2+內(nèi)流速率比野生型細胞平均高4.1倍(圖1)

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圖1. WT和hts1突變體葉肉細胞中測得的瞬時凈Ca2+內(nèi)流速率對高溫處理的響應。正值代表Ca2+內(nèi)流





其他實驗結果


  • HTS1利于水稻耐熱性和氧化應激響應

  • hts1突變體的熱超敏性是由LOC_Os04g30760基因的突變引起的

  • HTS1是由輪藻進化而來,在陸地植物中進化保守

  • HTS1定位于類囊體膜,可以被熱處理誘導

  • HTS1具有KAR活性和較高的熱穩(wěn)定性

  • hts1突變體在脂肪酸生物合成方面存在缺陷

  • 熱脅迫下,缺乏HTS1會加速破壞細胞膜的完整性。

  • HTS1缺失可能導致快速的Ca2+和ROS信號傳導,從而影響HsfA2s及其靶基因在熱脅迫下的轉(zhuǎn)錄激活。





結論

本研究的結論是,HTS1的缺乏直接損害了hts1突變體的脂肪酸生物合成和脂質(zhì)代謝。脂肪酸含量的減少(主要是C16:0和C18:3)破壞了熱應激下細胞膜系統(tǒng)的完整性和穩(wěn)定性,造成熱誘導的Ca2+和ROS信號轉(zhuǎn)導級聯(lián)的異常。HTS1的突變也會導致HSF和HSP網(wǎng)絡的轉(zhuǎn)錄活性受到抑制,從而導致HSR調(diào)節(jié)功能受損和熱損傷不受控制。因此,研究認為HTS1通過影響膜穩(wěn)定性、熱脅迫相關轉(zhuǎn)錄活性以及潛在的Ca2+和ROS信號,對水稻耐熱性至關重要,是de novo脂肪酸合成的關鍵因子(圖2)。研究高溫脅迫下脂肪酸合成與脅迫信號的關系,將有助于更好地了解未來氣候條件下的植物育種

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圖2. HTS1調(diào)控水稻耐熱性的工作模型。





測試液


0.1 mM KCl, 0.1 mMCaCl2, 0.5 mM NaCl, 0.3 mM MES, 0.2 mM Na2SO4, pH 6.5



關鍵熱;脂質(zhì);膜;信號;過氧化氫;水稻

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