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李時珍利用太醫院良好的學習環境，不但閱讀了大量醫書，而且對經史百家、方志類書、稗官野史，也都廣泛參考。同時仔細觀察了國外進口的以及國內貴重藥材，對它們的形態、特性、產地都一一加以記錄。過了一年左右，為了修改本草書，他再也不愿耽下去了，借故辭職。

在回家的路上，一天，李時珍投宿在一個驛站，遇見幾個替官府趕車的馬夫，圍著一個小鍋，煮著連根帶葉的野草，李時珍上前詢問，馬夫告訴說：“我們趕車人，整年累月地在外奔跑，損傷筋骨是常有之事，如將這藥草煮湯喝了，就能舒筋活血”。這藥草原名叫“鼓子花”，又叫“旋花”，李時珍將馬夫介紹的經驗記錄了下來。寫道：旋花有“益氣續筋”之用。此事使李時珍意識到修改本草書要到實踐中去，才能有所發現。

李時珍為了修改本草書，對各種醫書上的不同記載進行調查研究，為了搞清形態相似的蘋、水萍和萍逢草，曾到家門口的雨湖，還到較遠的馬口湖、沿市湖、赤東湖進行采集，耐心觀察比較，終于糾正了本草書上的長期混亂。

為了搞清白花蛇的形態，驗證書本記載，李時珍來到了蘄州城北的龍蜂山捕蛇（白花蛇為蘄州特產），只聽得有人唱道：“白花蛇，誰叫爾能辟風邪，上司索爾急如火，州中大夫只逼我，一時不得皮肉破”。隨著歌謠而來的是幾個肩背竹簍的捕蛇人，他們正朝著幾棵石楠藤走去，據說白花蛇愛吃石楠藤的葉，所以石楠藤也就成了白花蛇的“家”，日夜盤纏在石楠藤上。捕蛇人發現白花蛇后，立即從地上撈起一把沙土，對準白花蛇撒去，說來也奇，白花蛇遇到沙土，真像面粉遇水一樣，縮成了一團，捕蛇人立即上前用木叉往白花蛇的頸部叉去，另一手抓住蛇體的后部，這時白花蛇再也施不出威力來了。李時珍走上前去仔細觀察了白花蛇的形態，只見蛇頭大似三角形，嘴里長著4只長牙，背上有24塊斜方格，腹部還有斑紋，與一般的蛇，確實不一樣。接著，捕蛇人格蛇掛在路旁的小樹上，用刀剖其腹，去其內臟，盤曲后裝進了竹簍筐，據說，將蛇烘干后，才能當藥用。李時珍記錄了捕蛇過程中的每一個細節活動，不僅補充了本草書，也為后來編寫《白花蛇傳》，提供了重要材料。幾年后，李時珍又根據白花蛇的祛風特性，制成了專治半身不遂和中風的“白花蛇酒”。據現代藥理分析，證明白花蛇的提取物，具有鎮靜、鎮痛，擴張血管和降壓作用。