人小腦顆粒原代細胞

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 神經元細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

人小腦顆粒細胞分離自小腦皮層組織；神經元是神經系統基本的結構與功能單位，小腦顆粒神經元是體積較小的神經元，直徑約10μm，在中樞神經系統中含量非常豐富，近乎神經元數量的一半。由于小腦神經元的生長、分化和大腦皮層神經元相似，而且數量多、便于取材，因此小腦顆粒神經元是研究神經元生長發育、神經軸突再生及神經疾病發生機制和臨床神經藥理的重要手段。小腦顆粒神經元是小腦主要的中間神經元，在哺乳動物的小腦內數量為豐富。顆粒神經元的軸突與苔狀纖維和爬行纖維相聯系，形成小腦皮層內的神經元環路，在小腦的神經活動中起著非常重要的作用。在動物傳染性海綿狀腦病中，病變可波及小腦顆粒神經元，導致小腦皮層的神經元環路受損，從而呈現神經性行為失調。研究小腦顆粒神經元在動物傳染性海綿狀腦病病理學變化中的反應、病理發生的機理特別是分子機理，有賴于小腦顆粒神經元細胞模型的建立。小腦顆粒細胞的軸突是沿冠狀軸分布的平行纖維，正是這種排列保證了興奮的單向傳導，這是小腦功能理論中的關鍵假設，小腦顆粒細胞通過g-氨基丁酸接受戈爾吉細胞的抑制性突觸的信息傳入。

方法簡介：

公司實驗室分離的人小腦顆粒細胞采用蛋白酶消化法結合神經元專用培養基、化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的人小腦顆粒細胞經β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養法

　?、?懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

CM-R003大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞AHSG Others Human 人 Fetuin-A / AHSG / FETUA 人細胞裂解液   小鼠神經干細胞(EGFP標記) 人肺癌細胞 NG108-15 [ 108CC15 ](小鼠神經細胞瘤與大鼠神經膠質瘤之融合細胞) 小鼠原代腎臟巨噬細胞 大鼠原代角膜上皮細胞

Beta-Amyloid(1-16 0.5mgBeta-Amyloid(1-16) β淀粉樣肽1-16(多肽蛋白)

ITGA5 & ITGB1 Protein Human 重組人 ITGA5 & ITGB1 Heterodimer 蛋白

CTLA4重組小鼠 CTLA4 / CD152 蛋白 Protein

ADAM17 Protein Rat 重組大鼠 ADAM17 蛋白

NRG1重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標簽) Protein

人抑制素A(INH-A)ELISA 試劑盒

Human ansthyretin (T) ELISA Kit 人轉甲狀腺素蛋白(T)試劑盒

HumanIestinalefoilfactor,ITFELISAKit 人腸三葉因子(ITF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanIerleukin12,IL-12/P40試劑盒人白介素12(IL-12/P40)試劑盒規格：96T/48T

組織科薩基病毒A(CoxsackievirusA)定性試劑盒20次

HumanIPO-38ELISAKit人IPO-38蛋白(IPO38)試劑盒規格：96T/48T

人載脂蛋白E(ApoE)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human ApoE (Apolipoprotein E) ELISA Kit

人載脂蛋白F(ApoF)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human ApoF (Apolipoprotein F) ELISA Kit

人載脂蛋白H(ApoH)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human ApoH (Apolipoprotein H) ELISA Kit

人載脂蛋白M(ApoM)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human ApoM (Apolipoprotein M) ELISA Kit

人小腦顆粒原代細胞豚鼠白介素18(IL-18)試劑盒 ，英文名： IL-18 ELISA Kit

Human ubiquitin ligase (E3/UBPL) ELISA Kit 人泛素連接酶(E3/UBPL)試劑盒

rabbitIerleukin8,IL-8ELISAKit 兔子白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta-CGELISAKit大鼠絨毛膜β

細菌乙醇脫氫酶總活性比色法定量試劑盒20次

RabbitFibrinogen,FbgELISAKit兔血纖蛋白原(Fbg)試劑盒規格：96T/48T

SOST重組大鼠 Sclerostin / SOST 蛋白 Protein

Hpt/HP(haptoglobin 0.5mgHpt/HP(haptoglobin) 結合珠蛋白/觸珠蛋白抗原

YES1重組人 c-Yes / YES1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

CFHR1 Protein Human 重組人 CFHR1 蛋白

MIF Protein Mouse 重組小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白