大鼠小腸血管內皮原代細胞

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠小腸血管內皮細胞分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的，因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切；構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能，其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力，促使食物向下運動。血管內皮細胞除了吞噬異物、細菌、壞死和衰老的組織等，還參與集體免疫活動，包括：①血管收縮及血管舒張，從而控制血壓；②凝血（血栓形成及纖維蛋白溶解）；③動脈硬化；④血管生成；⑤炎癥及腫脹（浮腫）；⑥內皮細胞亦控制一些物質，如白血球進出血管。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠小腸血管內皮細胞采用蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠小腸血管內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

C57小鼠黑色素瘤瘤株;ME (Me)  中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4B 小鼠L6565白血病克隆細胞系，L6565細胞 RTG細胞，鮭魚胚胎細胞  人間充質干細胞-骨髓總RNAHMSC-bm NA  CTLA4 Ig-24中國倉鼠卵巢細胞 鴨腦微血管內皮細胞永生化細胞 大鼠原代冠狀動脈內皮細胞

GLUT2(Glucose transporter type 2 0.5mgGLUT2(Glucose transporter type 2) 葡萄糖轉運蛋白2(抗原)

IL20 Protein Human 重組人 IL20 / Interleukin-20 蛋白

CDH17重組大鼠 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白 Protein

LGALS1 Protein Mouse 重組小鼠 Galectin-1 / LGALS1 蛋白

TPH1重組人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein

小鼠β酚(β-naphthol)LISA 試劑盒

Human vitamin B12 (VB12) ELISA Kit 人B12(VB12)試劑盒

Humanai-cailage-aibodyELISAKit 人抗軟骨抗體(ai-cailage-Ab)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCenomereProtein,CENP-B試劑盒人著絲粒蛋白B(CENP-B)試劑盒規格：96T/48T

轉基因玉米MON809品系試劑盒20次

HumanSerumamyloidA，SAAELISAKit人血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒規格：96T/48T

人組酸豐富糖蛋白(HRG)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human HRG (Histidine Rich Glycoprotein) ELISA Kit

人乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human HSPG (Heparan Sulfate Proteoglycan) ELISA Kit

人膜聯蛋白A5(ANXA5)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human ANXA5 (Annexin A5) ELISA Kit

人HA絲酸肽酶1(HA1)酶聯免疫吸附測定試劑盒   Human HA1 (HA Serine Peptidase 1) ELISA Kit

大鼠小腸血管內皮原代細胞豚鼠基質金屬蛋白酶9(MMP-9)試劑盒 ，英文名： MMP-9 ELISA Kit

Human apoptosis signal regulating kinase I (ASK-1) ELISA Kit 人凋亡信號調節激酶I(ASK-1)試劑盒

MonkeyIerferonγ,IFN-γELISAKit 猴γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforbFGF-6(Humanbasicfibroblastgrowthfactor6)ELISAKit人堿性成纖維細胞生長因子6

細菌乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動力比色法定量試劑盒20次

RabbitIerleukin3,IL-3ELISAKit兔子白介素3(IL-3)試劑盒規格：96T/48T

KLRC1重組小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 蛋白 (His 標簽) Protein

踝蛋白(TLN)重組蛋白 Recombinant Talin (TLN)

CBR3重組人 CBR3 / HCBR3 / Carbonyl Reductase 3 蛋白 (His 標簽) Protein

ACVR1B Protein Human 重組人 ALK4 / ACVR1B 蛋白 (His & Fc 標簽)

NRG1 Protein Canine 重組狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標簽)