大鼠肝內膽管上皮原代細胞

培養信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠肝內膽管上皮細胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用；肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。通過控制激素調控的分泌和吸收，在保持、調整和擴大膽小管的結構中發揮重要作用，肝內膽管上皮細胞在先天性和獲得性免疫應答方面起著積極作用。肝內膽管上皮細胞約占肝細胞總數的5%，其在肝內膽道系統內形成復雜的網狀管形結構。肝內膽管上皮細胞具有復雜的生理代謝功能，參與肝臟的代謝、排泌、免疫等生理過程，在肝臟疾病的發生發展過程中起一定的作用。研究表明，常見的肝內膽管病變例如原發性硬化性膽管炎、膽管癌等疾病，都是以肝內膽管上皮細胞為病變靶位，進而引起肝內膽管上皮損傷。因此，了解正常肝內膽管上皮細胞的生物學特征和病變肝內膽管上皮細胞的病理特征對研究肝內膽管病變的發病機制、診斷和治療具有重要意義。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠肝內膽管上皮細胞采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯合消化，接種至預先包被鼠尾膠原的培養瓶中，通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠肝內膽管上皮細胞經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

A-204細胞，人橫紋肌肉瘤細胞 兩歧雙歧桿菌 人肝永生化細胞;THLE-3  F81(貓細胞)     人羊膜間充質基質細胞 Sars蛋白表達株，293001A細胞 NCI-H596 [H596](人肺癌細胞)  CL-0065CoC1/DDP(人卵巢耐藥細胞亞株) 豬原代腎小球系膜細胞 大鼠原代胎盤間充質干細胞

PTEN/MMAC1 一種抑制基因抗原 0.5mgPTEN/MMAC1 一種抑制基因抗原

CECR1 Protein Human 重組人 CECR1 / ADA2 蛋白

NS2重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural Protein 2 / NS2 Protein

EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)

FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 標簽) Protein

小鼠仙臺病毒抗體(HVJ-Ab)試劑盒

Rat bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒

Humannon-neuronalenolase,NNEELISAKit 人非神經元性烯醇化酶(NNE)試劑盒 進口分裝

ChickenHeatShockProtein70,Hsp-70試劑盒雞熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒

載玻片細胞CDK3蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseHeatShockProtein90,Hsp-90ELISAKit小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒

魚類釋放激素試劑盒   魚類釋放激素試劑盒   規格型號：96T/48T   魚類釋放激素試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：魚類釋放激素試劑盒、魚類釋放激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

魚類白介素1α試劑盒   魚類白介素1α試劑盒   規格型號：96T/48T   魚類白介素1α試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：魚類白介素1α試劑盒、魚類白介素1αeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

魚促上腺皮質激素試劑盒   魚促上腺皮質激素試劑盒   規格型號：96T/48T   魚促上腺皮質激素試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：魚促上腺皮質激素試劑盒、魚促上腺皮質激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

豬甘油三酯試劑盒   豬甘油三酯試劑盒   規格型號：96T/48T   豬甘油三酯試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進口分裝），產品別名：豬甘油三酯試劑盒、豬甘油三酯eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

大鼠肝內膽管上皮原代細胞小鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human keratan sulfate (KS) ELISA Kit 人角質素(KS)試劑盒

Humannonmethylatedoligonucleotide,NONELISAKit 人非甲基化寡核苷酸(NON)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickensecretoryimmunoglobulinA,SIgA試劑盒雞分泌型免疫球蛋白A(SIgA)試劑盒規格：96T/48T

載玻片細胞PARP蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseFibronectin,FNELISAKit小鼠纖連蛋白(FN)試劑盒規格：96T/48T

IL1RN重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽) Protein

GABA/KLH γ1氨基偶聯血藍蛋白 1mgGABA/KLH γ1氨基偶聯血藍蛋白

CD22重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白 Protein

IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169)

KIT Protein Mouse 重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。