大鼠骨外膜原代細胞

培養信息：

包被條件

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠骨外膜細胞分離自骨外膜組織；骨外膜是指成骨細胞與破骨細胞緊貼骨密質外面包著的那層膜；在骨外膜和骨內膜中含有一種能夠生成骨的細胞，稱為成骨細胞，這種細胞具有使骨骼生長的功能。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細胞的細胞，稱為破骨細胞。這兩種細胞作用相反又相互依據。成骨細胞像建筑工人，不停地生成新的骨組織，破骨細胞則像維修工人，不停地清除老化、死亡、破碎的骨結構，并且還負責拆除“違章建筑"，就是除去不需要的多余的骨組織，從而使骨的整體結構更符合生物力學的需要。正常情況下，兩種細胞之間處于動態的平衡之中，完成骨的生長發育的新陳代謝。骨折之后，成骨細胞首先啟動，從而促使新骨痂的生成，即骨折的愈合。但是，股痂只是恢復了骨的連續性，往往不符合生物力學的需要，改建塑形的過程則必須有破骨細胞的參與才能完成。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠骨外膜細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的大鼠骨外膜細胞經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養法

　　③ 懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　　④器官培養

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養箱中靜置 6-8 小時，以穩定細胞狀態。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養箱中培養。

4)待細胞貼壁后，培養觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養基。

Hep G2(人肝癌細胞)   MSTO-211H(人肺癌細胞)     犬腎細胞;MDCK(NBL-2)  HCPEpiC細胞，人脈絡叢上皮細胞 小鼠淋巴瘤細胞,Nb2-11細胞 人前脂肪細胞-皮下cDNAHPA-s cDNA 小鼠原代腸巨噬細胞 兔原代大隱靜脈平滑肌細胞

白介素12受體β2(IL2Rβ2)重組蛋白 Recombinant Interleukin 12 Receptor Beta 2 (IL12Rb2)

DPP10 Protein Human 重組人 DPP10 / DPRP3 蛋白

SERPINB6B重組小鼠 Serpinb6b 蛋白 Protein

TNFSF4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 OX-40L / TNFSF4 蛋白 (Fc 標簽)

SAE1重組人 SAE1 蛋白 Protein

大鼠細胞色素P450家族成員1A2(CYP1A2)試劑盒 ，英文名： CYP1A2 ELISA Kit

Mouse nerve nuition factor 4 (-4) ELISA Kit 小鼠神經營養因子4(-4)試劑盒

Mousebrain-gpeptides,BGP/GehrelinElisakit 小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHSP-70(MouseHeatShockProtein70)ELISAKit小鼠熱休克蛋白70

細胞KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定量PCR擴增試劑盒20次

ELISAKitIL-23大鼠白介素23

胃動蛋白2   英文名稱：   Human Gasokine 2   規格：      英文縮寫：   GKN-2

內源性糖皮質激素   英文名稱：   Human Glucocoicoid Endogenous   規格：      英文縮寫：   GC

葡萄糖激酶   英文名稱：   Human Glucokinase   規格：      英文縮寫：   GCK

葡萄糖60酸脫氫酶   英文名稱：   Human Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase   規格：      英文縮寫：   G6PD

大鼠骨外膜原代細胞小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human pepsinogen C (PG-C) ELISA Kit 人原C(PG-C)試劑盒

HumanEsogeeceptor,ERELISAKit 人雌激素受體(ER)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCoronavirusesIgG試劑盒人流行性乙型腦抗體IgG(JEIgG)試劑盒規格：96T/48T

組織CDK6/CYCD3激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

Humanproteiyrosinekinase,PTKELISAKit人蛋白酪激酶(PTK/CD115)試劑盒規格：96T/48T

EPO重組小鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白 (His 標簽) Protein

抵抗素(RETN)重組蛋白 Recombinant Resistin (RETN)

PMM2重組人 Phosphomannomutase 2 / PMM2 / CDG1 蛋白 (His 標簽) Protein

FES Protein Human 重組人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 蛋白 (His & GST 標簽)

EPHA4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 EphA4 蛋白 (His 標簽)