詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:HIF-1抑制劑(KC7F2)
英文名稱:KC7F2
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
KC7F2是一種有效的HIF-1途徑抑制劑,可用作癌癥治療劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:927822-86-4 純度:99.38% 分子量:570.38 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
腐霉鋅指蛋白300(抗原)Anti-GMFB Antibody人相關蛋白A(CagA)
枯草芽胞桿菌鋅指脂蛋白-1a(抗原)Anti-GM-CSF(CSF2) Antibody人相關蛋白A(CagA)
曲霉屬鋅指脂蛋白-1b(抗原)Anti-GMFG Antibody人胃抑(GIP)
小單孢菌人鋅指脂蛋白-1c(抗原)Anti-GNA14 Antibody人胃抑(GIP)
真鲴希瓦氏菌干擾-γ多肽抗原(大、小鼠)Anti-GNAI3 Antibody人胃泌釋放多肽(GRP)
淡紫擬青霉干擾-β抗原Anti-GNA14 Antibody人胃泌釋放多肽(GRP)
竹瘤座菌干擾-β抗原Anti-GNAL Antibody人胃泌釋放肽前體(ProGRP)
冷杉粘褶菌前列腺干抗原Anti-GNAT1 Antibody人胃泌釋放肽前體(ProGRP)
壞損尾孢聚集蛋白抗原Anti-GNAT1 Antibody人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)
泡盛曲霉三磷腺檸檬裂解Anti-GNAZ Antibody人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)
紫芝脂肪增強結合蛋白1Anti-GNAT2 Antibody人促胰液/胰泌(Secretin)
枯草芽孢桿菌磷化腺苷單磷活化蛋白激α1Anti-GNB5 Antibody人促胰液/胰泌(Secretin)
鼠李糖乳桿菌腎上腺髓質(1-52)Anti-GNE Antibody人多肽YY(Peptide-YY)
澳型核果褐腐病菌淀粉樣肽前體蛋白(多肽抗原)Anti-GNB5 Antibody人多肽YY(Peptide-YY)
土壤柔武氏菌促腎上腺皮質激(1-39)Anti-GNE Antibody人促胃液受體(GsaR)
干酪乳桿菌脂聯(多肽抗原)Anti-GNL1 Antibody人促胃液受體(GsaR)
絲/蘇蛋白激SIK1抗體藤黃八疊球菌人惡性霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞
基底膜相關軟骨蛋白多糖抗體潮濕纖維單胞菌人多發性骨髓瘤細胞(白介15基因修飾)
小細胞跨膜糖化蛋白抗體產黃纖維單胞菌高轉移潛能肝癌細胞
合胞1抗體黃色短桿菌人皮膚T淋巴瘤細胞
HIF-1抑制劑(KC7F2)根瘤 聚烯酸樹脂Ⅱ
高雄山蟲草 4-溴
假小鏈雙歧桿 乙酸鈰
大毛霉 2,4-二甲酸
大腸埃希氏 七氧化四鋱
香港橫梗霉 間羥基
絲蘭近藤氏酵母 環磷酰
釀酒酵母 乙酰氨基二酸二乙酯
黃萎輪枝孢* K-膠
費希爾曲霉 I-膠
冬蟲夏草 膠
E.coli HT115(DE3) 苯佐
阿舒假囊酵母 硅藻土載體
海球 硅藻土
黃色革蘭氏 羊毛脂