化工儀器網
詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
TAK-593 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg | 1～3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：
TAK-593是有效的VEGFR2和PDGFR抑制劑，對VEGFR1,VEGFR2,VEGFR3,PDFGRα和PDFGRβ的IC50值分別為3.2，0.95，1.1，4.3和13nM。 注：本品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他用途！ CAS號：1005780-62-0 純度：96.86% 分子量：445.47 儲存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內檢測）。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），FITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環。
淡紫擬青霉Bacillus sp.大鼠骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)
模擬乳粉克羅諾桿菌質控樣品（定性） Bacillus sp.大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)
平滑假絲酵母Bacillus sp.大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)
地中海新殼梭孢Halobacillus sp.大鼠促甲狀腺(TSH)
靈芝Bacillus sp.大鼠促甲狀腺(TSH)
擬盤多毛屬Bacillus sp.大鼠皮質(Cortisol)
扣囊復膜孢酵母Bacillus sp.大鼠皮質(Cortisol)
蔬菜芽孢桿菌Bacillus sp.大鼠雌二(E2)
小鏈桿菌屬Bacillus sp.大鼠雌二(E2)
海濱鹽紅菌Bacillus sp.大鼠脫氫表雄硫酯(DHEA-S)
落花生短胖孢Bacillus sp.大鼠脫氫表雄硫酯(DHEA-S)
亮白曲霉Bacillus sp.大鼠睪(T)
杰丁塞伯林德納氏酵母Bacillus sp.大鼠睪(T)
枯草芽孢桿菌Bacillus sp.大鼠游離睪(F-TESTO)
巨大芽孢桿菌Bacillus sp.大鼠游離睪(F-TESTO)
Sphingomonas adhaesiva Bacillus sp.大鼠雄烯二(ASD)
T淋巴瘤侵襲轉移誘導蛋白1抗體木糖氧化產堿桿菌暗灰色馬杜放線菌
色相關蛋白3抗體沙地芽孢桿菌棒狀鏈霉菌
胸腺基質淋巴細胞生成-1抗體解酪蛋白巨大球菌北里孢菌屬
組織因子抗體遲鈍愛得華氏菌草色串孢
VEGFR2和PDGFR抑制劑(TAK-593)釀酒酵母 對葉百部堿
釀酒酵母 紫云英苷
釀酒酵母 葒草苷
孢淡灰鏈霉 野百合堿
球孢枝孢 桔梗皂苷D
綠色木霉 吉馬酮
球孢白僵 異鉤藤堿
蝙蝠蛾擬青霉 透析夾
枯草芽孢桿枯草亞種 透析夾
香菇 鉤藤堿
假單胞 馬錢苷
三色青霉 蝙蝠葛堿
大腸埃希氏(大腸桿)* 透析夾
普通高溫放線 濱蒿內酯
豬瘟陰、陽性血清國家參考品 (R型)人參皂苷Rh1
化工儀器網