詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
TCS PIM-1 1 | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
TCS PIM-1 1(sc-204330)是ATP競爭性Pim-1激酶抑制劑,IC50為50nM,比對Pim-2和MEK1/MEK2的抑制性較高。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:491871-58-0 別名:SC 204330 純度:97.41% 分子量:367.2 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
牛摩氏菌Escherichia coli大鼠D-乳脫氫(D-LDH)
FlavobacteriumEscherichia coli大鼠胸腺活化調節趨化因子(TARC/CCL17)
漢遜德巴酵母Escherichia coli大鼠胸腺活化調節趨化因子(TARC/CCL17)
盤長孢狀盤孢Escherichia coli大鼠膽固(CH)
白鱗蘑菇Escherichia coli大鼠膽固(CH)
乳乳球菌乳亞種Escherichia coli大鼠甘油三酯(TG)
唾液乳桿菌Escherichia coli大鼠甘油三酯(TG)
梭形凸臍蠕孢Escherichia coli大鼠低密度脂蛋白(LDL)
毛霉Escherichia coli大鼠低密度脂蛋白(LDL)
香菇Escherichia coli大鼠高密度脂蛋白(HDL)
黑曲霉Escherichia coli大鼠高密度脂蛋白(HDL)
傷口諾氏菌Escherichia coli大鼠孕受體(PGR)
米蘭鏈霉菌Escherichia coli大鼠孕受體(PGR)
粘滑菇屬Escherichia coli大鼠血管緊張Ⅱ轉化(ACEⅡ)
松口蘑Escherichia coli大鼠血管緊張Ⅱ轉化(ACEⅡ)
黑曲霉Escherichia coli大鼠血管緊張Ⅰ轉化(ACEⅠ)
蛋白酪磷受體型4抗體桑木層孔菌人胚肺細胞VA13細胞
6磷果糖激抗體氏針層孔菌小鼠皮下結締組織細胞
磷激1抗體勞埃德木層孔菌兔角膜前基質層成纖維細胞
磷變位1抗體平滑木層孔菌新生牛眼晶體上皮細胞
Pim-1激酶抑制劑(TCS PIM-1 1)惡臭假單胞 液體硫乙酸鹽培養基
近弧狀短波單胞 L-天冬酰
釀酒酵母 L-天冬
土曲霉 皰肉牛肉粒
齊藤假絲酵母 L-蘇
阿舒假囊酵母 皰肉培養基基礎
分枝節桿 L-絲
淺金鏈霉 多價蛋白胨-酵母膏(PY)培養基
西班牙弧 L-色
梅瑞狄斯氏靈芝 L-鼠李糖
產氣莢膜梭 C型 多粘B(1.2mg)
多量毛霉 茄尼
哈茨木霉 千層紙
黃傘 亞硫酸鹽-多粘-磺嘧啶瓊脂基礎
凍干粉 副溶血性弧(定量) 10-羥基癸烯酸