詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
中文名稱:ILK抑制劑(OSU-T315)
英文名稱:OSU-T315
產品規格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
OSU-T315是一種新型的ILK抑制劑,IC50值為0.6μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1333146-24-9 純度:99.42% 分子量:533.59 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
米根霉腸道病71型/手足口病病抗原(C端)Anti-CLASP1 Antibody人紅激因子(ESF)
松口蘑植物擴張蛋白ATEXPA10(擬南芥)抗原Anti-CLASP1 Antibody人紅激因子(ESF)
芽孢桿菌埃茲蛋白(多肽)Anti-Claudin 7 Antibody人腫瘤壞死因子相關激活誘導因子(TRANCE)
彎曲芽孢桿菌鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(N端多肽)Anti-CLASP1 Antibody人腫瘤壞死因子相關激活誘導因子(TRANCE)
大麗輪枝霉鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(C端多肽)Anti-CLCC1 Antibody人生長激釋放因子(GH-RF)
蠟狀芽孢桿菌腦型脂肪結合蛋白抗原Anti-CLCF1 Antibody人生長激釋放因子(GH-RF)
淡黃青霉Fas死亡結構域相關蛋白抗原Anti-CLCN4 Antibody人巨噬趨化因子(MCF)
槐栓菌粘著斑激抗原Anti-CLCN6 Antibody人巨噬趨化因子(MCF)
枯草芽胞桿菌磷化粘著斑激抗原Anti-CLCN7 Antibody人α/β干擾受體(IFN-α/βR)
芽孢桿菌磷化粘著斑激抗原Anti-CLCN7 Antibody人α/β干擾受體(IFN-α/βR)
維多亞維希尼克氏酵母Fas活化的絲/蘇激抗原Anti-CLCNKA Antibody人B生長因子(BCGF)
微小鏈霉菌原纖維蛋白1抗原Anti-CLDN19 Antibody人B生長因子(BCGF)
細小磚紅鐮孢菌纖維母生長因子4抗原Anti-CLDN1 Antibody人B分化因子(BCDF)
沼澤類芽孢桿菌纖維母生長因子5抗原Anti-CLDN10 Antibody人B分化因子(BCDF)
不動桿菌衰老關鍵蛋白抗原Anti-CLDN19 Antibody人上皮粘附分子(Ep-CAM/CD362)
黃曲霉FosB抗原Anti-CLDN2 Antibody人上皮粘附分子(Ep-CAM/CD362)
鈣調蛋白依賴性蛋白激磷抗體串珠鐮孢鼠神經元細胞
原鈣粘蛋白11抗體玖紅穗狀霉小鼠肺鱗癌細胞
紅細胞磷脂酰肌聚糖A抗體亞麻刺盤孢人角膜內皮細胞
細小清蛋白抗體休哈塔假絲酵母小鼠心肌成纖維細胞
ILK抑制劑(OSU-T315)廣鹽鏈霉 4-Cadinen-7-ol
多形炭團 4,8-Dihydroxyeudesm-7(11)-en-12,
紅細屬 4-(trans)-Acetyl-3,6,8-trihydrox
長孢糖絲 5-Hydroxy-7,8-dimethoxyflavanone
三線鐮刀 4-(cis)-Acetyl-3,6,8-trihydroxy-
中慢生華癸根瘤 3-羥基羊毛甾-9(11),24-二烯-26-酸
白環柄菇 3-O-p-Coumaroyloleanolic acid
大腸埃希 植酸鈣鎂
假單胞屬 3-O-Methyltirotundin
Paenibacillus 3-Hydroxycatalponol
大連硫膨大桿 3'-Hydroxy-3,9-dihydroeucomin
糙卷霉 3-Acetoxy-27-hydroxy-20(29)-lupe
微紫青霉 3,4-Didehydrosapriparaquione
運青糖單孢 3,4,4',7-Tetrahydroxyflavan
內串生孢霉屬 3,27-二羥基-20(29)-流明-28-酸甲酯