詳細介紹
商品介紹:
EPZ004777是一種有效的選擇性DOT1L抑制劑,IC50為0.4nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1338466-77-5 純度:99.89% 分子量:539.67 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
中文名稱:DOT1L抑制劑(EPZ004777)
英文名稱:EPZ004777
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
松鼠葡萄球菌磷化抑癌蛋白EZH2抗體Human PPP1R9A ELISA Kit血漿抗凝蛋白S(PS)
Pseudomonas batumici 組蛋白去甲基化JARID1B抗體Human PPP1CC ELISA Kit血漿抗凝蛋白C(PC)
少孢哈薩克斯坦酵母硫角質抗體Human PPP3R2 ELISA Kit血漿激肽釋放(KLKB1)
玫煙色棒束孢角質生長因子調節蛋白2抗體Human PPP2CA ELISA Kit血漿膽固酯轉移蛋白(CETP)
Bacillus sp.離子通道蛋白G蛋白4抗體Human PPP2R1B ELISA Kit血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)
海假交替單胞菌通道多聚體結構域KCTD18抗體Human PPP2CB ELISA Kit血紅氧合2(HO-2)
多主葡萄殼菌胞質接頭蛋白Keap1Human PPP1CC ELISA Kit血紅氧合1(HO-1)
芽胞桿菌舞蹈癥相關蛋白KALRN抗體Human PPP1R10 ELISA Kit血紅加氧2(HO-2)
多粘類芽孢桿菌內流通道蛋白Kir4.1抗體Human PPP2R2A ELISA Kit血紅加氧1(HO-1)
金黃色葡萄球菌金黃亞種樣蛋白3抗體Human PPP2R2B ELISA Kit血紅加氧(HO)
釀酒酵母KLF樣轉錄因子7抗體Human PPP1R7 ELISA Kit血紅蛋白晚期糖基化終末產物(Hb-AGE)
枯草芽孢桿菌Kelch樣蛋白8抗體Human PPP3CB ELISA Kit血紅蛋白β亞基(HB-β)
雞新城疫病血凝抑制試驗(HI)陽性血清離子通道蛋白家族KCNQ2抗體Human PPP1R8 ELISA Kit血紅蛋白α亞基(HB-α)
黑曲霉離子通道多聚體結構域蛋白7抗體Human PPP3CC ELISA Kit血紅蛋白H(HbH)
黃桿菌通道蛋白1抗體Human PPP1R9A ELISA Kit血紅蛋白C(HbC)
大斑凸臍蠕孢電壓門控通道蛋白1抗體Human PPP3R2 ELISA Kit血紅蛋白(Hb)
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質量規格:>97.0%(T)去氫木香內酯
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規格:>97.0%(T)百秋李
巴斯德畢赤酵母Pichia│pastoris 質量規格:>96.0%(GC)β-胡蘿卜
DOT1L抑制劑(EPZ004777)熱帶假絲酵母 2-氨基-3-吡啶甲脂肪甘油三酯脂Elisa
大腸埃希氏 N-叔丁氧羰基-1,3-二α-乳球蛋白Elisa
枯草芽孢桿 二烷(DMAB)趨化因子10Elisa
肺炎克雷伯氏肺炎亞種 (S)-(+)-2-甲基哌腺病3型Elisa
肉糜 馬源性成分(定性) 三丁基乙烯基錫半乳糖Elisa
中國漢納酵母乳酸變種 2-基苯甲前列腺F2αElisa
枯草芽孢桿 5,10,15,20-四(3,5-二甲氧苯基)卟啉乳房鏈球Elisa
特異腐質霉 3'- 乙酰氨基苯乙酮糖原Elisa
大腸埃希氏 2'-氟-4'-甲氧基苯乙酮二酰甘油O-?;D移同源物1Elisa
曲霉 間苯二甲酸二苯酯肉堿棕櫚酰轉移IElisa
Thielavia 1-(3-基)可可堿促腎上皮質釋放Elisa
泗川類芽孢桿 N,N'-二苯基對苯二糖皮質Elisa
壁芽孢桿 3, 3-二甲氧基酸甲酯血清淀粉樣蛋白Elisa
蠟蚧 (S)-(-)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧酸伴肌球蛋白Elisa
蠟樣芽孢桿 3,5-雙(三氟甲基)苯酸伴肌動蛋白Elisa