詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Apilimod mesylate | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Apilimod(STA5326)甲磺酸鹽是IL-12/IL-23抑制劑,能抑制IFN-γ/LPS刺激的人PBMC產生IL-12,IC50為10nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:870087-36-8 別名:STA 5326 mesylate 純度:99.11% 分子量:610.7 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
*發根土壤桿菌6號染色體開放閱讀框50抗體Human rT3(Reverse Triiodothyronine) ELISA Kit人糖脂抗體(glycolipid)免疫試劑盒
尖槐藤根瘤菌1號染色體開放閱讀框151抗體Human SCG2(Secretogranin II) ELISA Kit人糖盞蛋白免疫試劑盒
黑褐鵝膏菌腫瘤壞死因子受體超家族成員9抗體Human RXFP1(Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 1) ELISA Kit人糖原磷化同工MM(GP-MM)免疫試劑盒
高盧根瘤菌復合前列腺特異性抗原單克抗體Human RNASE(Ribonuclease) ELISA Kit人糖原磷化同工II(GP-II)免疫試劑盒
松口蘑組織蛋白z抗體Human SDH(Succinate Dehydrogenase) ELISA Kit人糖原磷化同工BB(GP-BB)免疫試劑盒
鮑魚菇2號染色體開放閱讀框84抗體Human RNASEN(Ribonuclease III, Nuclear) ELISA Kit人糖原磷化(GP)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌枯草亞種磷化鈣/鈣調依賴蛋白激2α抗體Human sdLDL(Small Dense Low Density Lipoprotein) ELISA Kit人糖原合成激3(GSK-3)免疫試劑盒
樟疫霉組織蛋白A抗體Human RNASET2(Ribonuclease T2) ELISA Kit人糖原合成激(GSK)免疫試劑盒
擬康寧木霉CD34抗體Human RPS6Kβ1(Ribosomal Protein S6 Kinase Beta 1) ELISA Kit人糖原合成免疫試劑盒
擬青霉周期D3抗體Human Sec23b(protein transport protein Sec23B) ELISA Kit人糖缺失性轉鐵蛋白(CDT)免疫試劑盒
嗜麥芽寡養單胞菌緊密連接蛋白1抗體(C端)Human RTN4(Reticulon 4) ELISA Kit人糖皮質激受體β(GR-β)免疫試劑盒
蓋氏海桿狀菌轉錄調節因子C/EBP α 抗體Human rT3(Reverse Triiodothyronine) ELISA Kit人糖皮質激受體α(GR-α)免疫試劑盒
帚狀曲霉核黃轉運蛋白2抗體Human proPSA(precursor of Prostate Specific Antigen) ELISA Kit人糖磷脂酰肌(GPI)免疫試劑盒
大腸埃希菌磷化鈣介質抗體Human RARS(Arginyl tRNA Synthetase, cytoplasmic) ELISA Kit人糖類抗原72-4(CA72-4)免疫試劑盒
粘孢白僵菌7號染色體開放閱讀框26抗體Human RARα(Retinoic Acid Receptor Alpha) ELISA Kit人糖類抗原50(CA50)免疫試劑盒
黃曲霉衰變加速因子CD55抗體Human PRR4(Proline Rich Protein 4, Lacrimal) ELISA Kit人糖類抗原19-9(CA19-9)免疫試劑盒
海桿狀菌Marinobacter│sp. 質量規格:活:>200 NADP units/mg,BCc-fos ELISA Kit二氫歐山芹醋酯
假單胞菌Pseudomonas│sp. 質量規格:>98%,BRCDCP1試劑盒二氫魚藤
指狀青霉Penicillium│digitatum 質量規格:>96%,BRCD8分子試劑盒二氫黃連堿
IL-12/IL-23抑制劑(Apilimod mesylate)Patched/PTCH抗體包裝100g
前列腺E合成抗體包裝25g
過氧化物體增殖物激活受體γ輔激活子1α抗體包裝500g
絲/蘇蛋白激Plk1抗體包裝1g
磷化絲/蘇蛋白激Plk1抗體包裝5g
親環蛋白(親環)PPIG抗體包裝100g
磷化親環蛋白(親環)PPIG抗體包裝25g
磷化蛋白激AKT底物1抗體包裝25g
磷化腺衍生血管內皮生長因子抗體包裝5g
富含脯的酪激2抗體包裝1g
磷化富含脯的酪激2抗體包裝1g
磷化富含脯的酪激2抗體包裝25g
磷化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體包裝5g
磷化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體包裝1ml
磷化絲/蘇激p90RSK蛋白抗體包裝1g