詳細介紹
商品介紹:
ActinGreen(熒光素鬼筆環肽)是F-肌動蛋白的高親和力探針,由蘑菇毒素制成,與綠色熒光素(FITC) 偶聯。以納米摩爾濃度使用時,鬼筆毒素是方便的探針,可用于對固定和打孔的組織切片、細胞培養物或無細胞實驗體系中的F-肌動蛋白的標記、鑒別和定量。 ActinGreen 與肌動蛋白對于不同的物種,包括植物和動物具有幾乎相同的高結合屬性。鬼筆環肽結合具有高選擇性,而F-肌動蛋白熒光綠色熒光。呈現出很少的非特異性染色。本產品可以用于熒光顯微鏡、微孔板、比色皿和流式細胞儀。 濃度:200U/mL 儲存:-20℃,避光,有效期6個月。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Actin-Tracker Green | 200μL | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
白茅根(標準品)英文名稱: Manganese dioxide磷化轉錄接頭蛋白EP300抗體包裝500ml
白皮杉,3'-羥基白藜蘆;比杉特(標準品)英文名稱: N,N'-Diphenylurea磷化轉錄因子ELK1抗體包裝25g
白皮杉-3'-O-葡萄糖苷英文名稱: PEG 600磷化轉錄因子ELK1抗體包裝5g
白前(標準品)英文名稱: Prussian blue磷化雌激受體α抗體包裝1mg
白屈菜(標準品)英文名稱: Pyronin B磷化真核翻譯起始因子4B抗體包裝1g
白屈菜紅堿(標準品)英文名稱: X-Galactosamidide真核翻譯起始因子4B抗體包裝250mg
白芍(標準品)英文名稱: Fucoxanthin磷化轉錄接頭蛋白EP300抗體包裝100g
白術(標準品)英文名稱: Brij 58磷化上皮癌轉化蛋白2抗體包裝25g
白術內酯III(標準品)英文名稱: Dithiooxamide磷化真核翻譯起始因子4G抗體包裝500g
白術內酯Ⅰ(標準品)英文名稱: DNase II, from Pocine Pancreas表皮生長因子受體5抗體包裝100g
白術內酯Ⅱ;蒼術內酯II(標準品)英文名稱: HEC, hydroxyethyl cellulose電子轉移黃蛋白β肽/黃蛋白抗體包裝25g
白頭翁(標準品)英文名稱: L-Aspartic acid sodium salt, monohydrate鈉通道蛋白α ENaC包裝500g
白頭翁皂苷A3(標準品)英文名稱: Lead granules轉錄因子E2F8抗體包裝1g
白頭翁皂苷B英文名稱: Mucin from bovine submaxillary glands內皮單核激活肽2抗體包裝5g
白頭翁皂苷B4(標準品)英文名稱: N,N'-Disuccinimidyl carbonate (DSC)外基質蛋白2抗體包裝25g
抵抗微桿菌Microbacterium│resistens 質量規格:HPLC>98%,標準品瞬時受體電位陽離子通道,亞科C,成員6試劑盒人參皂苷Rb2;GINSENOSIDE
白色假絲酵母菌Candida│albicans 質量規格:>900μg/mg, USP,BR閘蛋白14試劑盒人參皂苷Rb1;Ginsenoside
肺炎鏈球菌Streptococcus│pneumoniae 質量規格:標準品用于含量測定通道蛋白5試劑盒20(s)-人參皂苷Rg1;
微絲綠色熒光探針釀酒酵母 1,3-二溴-4,6-二氟苯葡萄糖苷Elisa
大腸埃希 甘油磷酸絲裂原激活蛋白激激6Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 4-溴-2,5-二氟孤兒G蛋白偶聯受體Elisa
木耳Au888 3-溴-2,6-二氟受體自身IgG抗體Elisa
彩色豆馬勃 2,4,6-三氟受體自身IgM抗體Elisa
暗擬莖點霉* 1-乙基吡唑受體自身IgA抗體Elisa
黑曲霉 3,5-二硝基-2-甲酸D-精氨酸Elisa
圍小叢殼 2-溴-6-甲氧基CD45分子Elisa
球孢白僵 (R)-(-)-1-氨基-2-酰基脫氫Elisa
枯草芽孢桿 4-乙氧基二苯甲酮長鏈脂酰基coA脫氫Elisa
青霉屬 2-氨基-,4-萘醌沙眼衣原體抗體Elisa
耐堿馬賽 4,4'-聯吡啶阿黑皮原Elisa
炭黑曲霉 3,5-二氯膀胱腫瘤抗原Elisa
黑附球 (R)-1-BOC-3-羥甲基哌腺苷酸環化關聯蛋白2Elisa
八孢裂殖酵母 5-氯苯并噻唑羧肽EElisa