詳細介紹
商品介紹:
Nutlin3是一種有效的p53-MDM2抑制劑,Ki為90nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:548472-68-0 純度:98.32% 分子量:581.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
產品屬性:
英文名稱:Nutlin 3
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
短小芽孢桿菌FSH 禽類聯免疫Anti-L1CAM Antibody人乙型肝炎病前S2抗原(HBV preS2Ag)
艾比湖嗜鹽堿紅菌LH 禽類聯免疫Anti-LAIR2 Antibody人乙型肝炎病前S2抗原(HBV preS2Ag)
枯草芽孢桿菌PRL 禽類聯免疫Anti-LAMA4 Antibody人庚型肝炎病IgM(HGV-IgM)
釀酒酵母魚雌二Anti-LAMA5 Antibody人庚型肝炎病IgM(HGV-IgM)
指狀游動放線菌大鼠Bcl-2相關X蛋白Anti-LAMA1 Antibody人輸血傳播病/辛型肝炎病((TTV)
蘋果盤二孢菌*兔子腫瘤壞死因子αAnti-LAMB1 Antibody人輸血傳播病/辛型肝炎病((TTV)
鏈格孢小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體Anti-LAMB2 Antibody人戊型肝炎病IgM(HEV-IgM)
解淀粉芽孢桿菌人胸腎表達趨化因子Anti-LAMB3 Antibody人戊型肝炎病IgM(HEV-IgM)
釀酒酵母人B-淋巴趨化因子Anti-LAMP3 Antibody人戊型肝炎病IgG(HEV-IgG)
蘇云金芽孢桿菌莫里遜亞種小鼠磷脂酰絲Anti-LATS1 Antibody人戊型肝炎病IgG(HEV-IgG)
赤紅球菌兔子轉化生長因子βAnti-LATS1 Antibody人丁型肝炎IgM(HDV IgM)
Pseudohaliea rubra魚促腎上腺皮質激Anti-LAMC3 Antibody人丁型肝炎IgM(HDV IgM)
尤韋可擬盤多毛孢大鼠可溶性凋亡相關因子Anti-LDLRAD1 Antibody人丁型肝炎IgG(HDV IgG)
廈門假單胞菌人膜粘連蛋白 Ⅱ ELISA 試劑盒Anti-LDB2 Antibody人丁型肝炎IgG(HDV IgG)
褐球固氮菌(可訂購)小鼠磷甘油酯Anti-LDB1 Antibody人型肝炎IgM(HCV-IgM)
味側耳(紫孢側耳)大鼠乙酰轉移Anti-LDLRAD2 Antibody人型肝炎IgM(HCV-IgM)
維甲受體γ抗體粗壯假絲酵母人急性單核細胞白血病細胞
Ras相關區域家族蛋白4抗體擬熱帶假絲酵母人乳腺癌細胞(耐阿霉)
細胞生長抑制蛋白34馬其頓假絲酵母人胃癌順鉑耐藥
Ras樣蛋白家族10A抗體郎比可假絲酵母人結腸癌細胞
p53-MDM2抑制劑(Nutlin 3)蘇云金芽胞桿 鳶尾酮
大腸桿 Hythiemoside A
鹽漬鹽單胞 Hirsutenone
泡盛曲霉 Hirsutanonol
間座殼 醋酸獨活屬
大腸埃希氏 Heraclenol 3'-O-beta-D-glucopyra
小單孢 鞭打繡球苷 B
金頭曲霉 異栓翅芹
近玫瑰色近藤氏酵母 異藤黃氧蒽酮 E
釀酒酵母 異莪術二烯
粘紅酵母 Isocupressic acid
異常漢遜酵母異常變種 異姜花D
釀酒酵母 Helichrysetin
熱噬淀粉芽孢桿 Hedyotisol A
腐皮鐮孢 果藥烯酮