商品介紹:
ACY-738是一種有效的,選擇性的HDAC6抑制劑,IC50值為1.7nM;同時(shí)可抑制HDAC1,HDAC2和HDAC3的活性,IC50值分別為94,128和218nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1375465-91-0 純度:99.14% 分子量:270.29 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:HDAC6抑制劑(ACY-738)
英文名稱:ACY-738
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
琉球曲霉白介受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白(抗原)Anti-FOXE3 Antibody人基質(zhì)金屬蛋白組織抑制因子1(TIMP-1)
芽枝狀枝霉白介6(白介-6)(多肽抗原)Anti-FOXE1 Antibody人基質(zhì)金屬蛋白組織抑制因子1(TIMP-1)
輪蟲(chóng)弧菌白介10(白介-10)(抗原)Anti-FOXI1 Antibody人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)
運(yùn)動(dòng)膠杜搟氏菌白介8(白介-8)(抗原)Anti-FOXH1 Antibody人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)
鼠李糖乳桿菌胰島受體(抗原)Anti-FOXJ1 Antibody人組織多肽抗原(TPA)
奇異球菌整合-α(抗原)Anti-FOXJ3 Antibody人組織多肽抗原(TPA)
矩圓黑盤(pán)孢低密度脂蛋白受體(抗原)Anti-FOXK1 Antibody人肺癌標(biāo)志物
平菇腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因(抗原)Anti-FOXN4 Antibody人肺癌標(biāo)志物
黃孢平革菌蛇蛋白Anti-FPR1 Antibody人胃癌標(biāo)志物
遲鈍愛(ài)德華氏菌蛇蛋白Anti-FRA2 Antibody人胃癌標(biāo)志物
側(cè)耳瘦(抗原)Anti-FOXR1 Antibody人鱗狀上皮癌抗原2(SCCAg-2)
PL20(雙抗黑平)瘦受體(抗原)Anti-FRK Antibody人鱗狀上皮癌抗原2(SCCAg-2)
加福尼亞接合擬威爾酵母Lpin1 protein(抗原)Anti-FSHB Antibody人胰腺癌標(biāo)志物CA242
大豆慢生根瘤菌蚯蚓纖溶(蚓激抗原)Anti-FRS3 Antibody人胰腺癌標(biāo)志物CA242
球孢白僵菌一種新的凋亡抑制蛋白(抗原)Anti-FUBP3 Antibody人胃腸癌標(biāo)志物CA199
*櫻桃鏈格孢絲裂原活化蛋白激p38(抗原)Anti-FYB1 Antibody人胃腸癌標(biāo)志物CA199
短鏈L-3羥烷基脫氫抗體嗜乳桿菌人卵巢癌細(xì)胞
離子轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白SLC7A9抗體短雙歧桿菌大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
核蛋白相互作用蛋白1抗體嬰兒雙歧桿菌小鼠胰腺腺泡細(xì)胞
FHOD3蛋白抗體清酒乳桿菌清酒亞種小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞
HDAC6抑制劑(ACY-738)米根霉 醋酸去氧皮質(zhì)酮
枯草芽孢桿 (3a,5b,12a)-N,N-雙[3-(D-葡萄糖酰氨基)基]-3,12-二羥基膽甾烷-24-
雞汁菇 焦磷酸銅
孢籃狀 硫酸銫
里氏木霉 碳酸鈰
平頭盤(pán)孢 N,N′-羰基二咪唑
枝孢屬 聚氧乙烯月桂
亞熱帶鏈霉 聚
彎梗根霉 辛乙烯二單正十二烷基酯
淺黃隱球酵母 九聚乙二單癸
減蛋綜合征病 六聚乙二單癸
Brenneria salicis 次水楊酸鉍
中華諾爾氏 檸檬酸鉍
釀酒酵母 (3a,5b,7a,12a)-N,N-雙[3-(D-葡萄糖酰氨基)基]-3,7,12-三羥基膽甾烷
多孢克魯維酵母 甲亞鹽-H