詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
UNC2250 | 1mL(10mM)|5mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
UNC2250是內源的Mer磷酸化抑制劑,IC50為9.8nM,能阻斷配體刺激的EGFR-Mer嵌合蛋白活化。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1493694-70-4 純度:99.81% 分子量:440.58 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
釀酒酵母(有現成的)金標記兔抗 (10nm/15nm)Anti-KIR3DL3 Antibody人EB病IgA(EBv IgA)
總狀共頭霉金標記親合(10nm/15nm)Anti-KIT Antibody人EB病IgA(EBv IgA)
褐環乳牛肝菌金標記蛋白A(10nm/15nm)Anti-KLF1 Antibody人EB病IgG(EBv IgG)
頂頭孢霉羊抗人免疫球蛋白AAnti-KLF1 Antibody人EB病IgG(EBv IgG)
大豆慢生根瘤菌兔抗人k-鏈Anti-KLF10/11 Antibody人什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)
油菜菌核病菌Anti-KLF11 Antibody人什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)
哈茨木霉Anti-KLF12 Antibody人登革熱抗體(DF-Ab)
ActinophytocolaAnti-KLF7 Antibody人登革熱抗體(DF-Ab)
乳乳球菌乳亞種Anti-KLHL29 Antibody人流感病抗體IgG(FLU)
膠紅酵母Anti-KLHL3 Antibody人流感病抗體IgG(FLU)
蠟狀芽孢桿菌Anti-KLKB1 Antibody人腺病IgM(ADV-IgM)
嗜氣薄層菌Anti-KLHL29 Antibody人腺病IgM(ADV-IgM)
Bacillus Anti-KLRB1C Antibody人腺病IgG(ADV-IgG)
微桿菌Anti-KLRC1 Antibody人腺病IgG(ADV-IgG)
伯氏疏螺旋體*兔白介1βAnti-KMT2A Antibody人輪狀病(RV)IgM
*匍枝根霉人原鈣黏1Anti-KMO Antibody人輪狀病(RV)IgM
RAS的GTP激活蛋白抗體菅囊酵母人腎透明細胞癌細胞
β淀粉樣蛋白前體結合蛋白B-1抗體亞膜漢遜酵母人腎上腺神經母細胞瘤細胞(腦轉移)
ras癌基因家族Rab2抗體施氏漢遜酵母人腎端小管上皮細胞
胰島細胞再生因子ICRF抗體異常漢遜酵母變種人肝內膽管上皮細胞
Mer磷酸化抑制劑(UNC2250)鴨疫里氏桿 Mearnsetin
溶藻細 Mangiferolic acid
日本根霉 Mallorepine
產核青霉 大果桉 C
棉花立枯 Lyoniside
水稻漢納酵母 石松
泰坦尼克鹽單胞 伸筋草萜寧
白黃側耳(姬菇) 羽扇豆異黃酮
埃里溫鏈霉 Lup-20(29)-ene-2α,3β-diol
堅強芽胞桿 Longistylin C
樹舌5-3 長管貝殼杉 E
球毛殼 洛柯堿
畢赤酵母屬 里查酮 A
層出鐮孢原變種 Lariciresinol acetate
球擬酵母屬 Kuwanon E