詳細介紹
商品介紹:
TAME是后期促進復合物(APC)抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:901-47-3 純度:99.80% 分子量:342.41 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
TAME | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
泡盛曲霉顯影液試劑Escherichia coli小鼠脫氫表雄(DHEA)
斑玉蕈(真姬菇、蟹味菇)定影液試劑Escherichia coli小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)
鏈格孢菌萘染色試劑盒Escherichia coli小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)
炭黑曲霉TMB 2HCl 3,3’5,5’-四甲基聯二鹽Escherichia coli小鼠內皮脂肪(EL)
擬青霉硝纖維膜(NC膜;膜孔徑0.45um)Escherichia coli小鼠內皮脂肪(EL)
元蘑特產1號PVDF膜/二氟化樹脂膜(膜孔徑:0.45um)Escherichia coli小鼠碳酐(CA)
啤酒酵母弗氏*佐劑(國SIGMA)Escherichia coli小鼠碳酐(CA)
鏈格孢屬弗氏不*佐劑(國SIGMA)Escherichia coli小鼠降鈣基因相關肽(CGRP)
殼菌超低范圍蛋白質分子量標準(3.3-20.1kDa)/5條帶Escherichia coli小鼠降鈣基因相關肽(CGRP)
大腸埃希菌低范圍蛋白質分子量標準(14.4-97.4KDa)/5條帶Escherichia coli小鼠胃動(MTL)
茶褐斑盤多毛孢預染寬范圍蛋白質分子量標準(19-117KD)/6條帶Escherichia coli小鼠胃動(MTL)
葡萄座腔菌預染低范圍蛋白質分子量Marker(14.4-97.4kDa)/6條帶Escherichia coli小鼠生長抑(SS)
嗜熱脂肪地球芽胞桿菌10XMOPSEscherichia coli小鼠生長抑(SS)
異常漢遜酵母超敏可逆型蛋白染色試劑盒Escherichia coli小鼠血纖蛋白原(Fbg)
大腸埃希氏桿菌可逆型蛋白轉移膜染色液Escherichia coli小鼠血纖蛋白原(Fbg)
廈門假單胞菌可逆型蛋白轉移膜染色液Escherichia coli小鼠血小板活化因子(PAF)
EGR1結合蛋白2抗體虎皮粘蓋牛肝菌豬小腸上皮細胞
NK2轉錄樣蛋白B抗體粘蓋牛肝菌大鼠腎足細胞
心臟特異性同源盒轉錄因子NKX2.5抗體彩色豆馬勃轉化人肝上皮細胞
核小體結合蛋白1抗體豹皮香菇小鼠顱頂前骨細胞亞克 14
APC抑制劑(TAME)火木層孔 一枝蒿甲
溜曲霉 十八烷基基化
食鳥噬冷 3-異酸酯基基氧基硅烷
樹脂枝孢霉 吳茱萸內酯
巨大芽孢桿 聚季鹽-10
藤黃微球 土大黃苷
江晨節桿 囊酸
Kocuria halotolerans N-氨乙基-3-氨基二甲氧基硅烷
釀酒酵母 安五酯
土地桿 芐基基
麥芽糖假絲酵母 連翹脂
發皮安假絲酵母 曲通x-405
間型假絲酵母 桃葉珊瑚苷
解淀粉芽孢桿 硫代甜菜堿10
黑曲霉 黑介子苷