詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
MK591 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
MK591是選擇性的,特異性的FLAP抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:147030-01-1 別名:Quiflapon sodium 純度:99.25% 分子量:609.15 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
枯草芽孢桿菌B淋巴淋巴瘤因子9抗體Human FREM1 ELISA Kit豚鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌膽綠還原抗體Human Frizzled 8 ELISA Kit豚鼠纖溶抗纖溶復合物(PAP)免疫試劑盒
干酪乳桿菌BIVM蛋白抗體Human FRS3 ELISA Kit豚鼠晚期糖基化終末產物(AGEs)免疫試劑盒
煙曲霉血型Lewis A抗原抗體Human Frizzled 7 ELISA Kit豚鼠嗜性粒陽離子蛋白(ECP)免疫試劑盒
耐輻射奇球菌粘蛋白/巖藻糖基轉移3抗體Human Frizzled 10 ELISA Kit豚鼠生長激(GH)免疫試劑盒
橢孢小隔指孢Bloom綜合征相關蛋白抗體Human Frizzled 9 ELISA Kit豚鼠腎(Renin)免疫試劑盒
蠶豆葡萄孢骨形態發生蛋白8b抗體Human FRK ELISA Kit豚鼠神經蛋白聚糖(NCAN)免疫試劑盒
肉色諾卡氏菌磷化非受體性蛋白酪激ETK抗體Human FOXD4 ELISA Kit豚鼠前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒
弗氏檸檬桿菌磷化促凋亡調節蛋白BNIP3抗體Human FOXQ1 ELISA Kit豚鼠皮質(Cortisol)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌168B淋巴特異性激活OCT結合蛋白1抗體Human FOXP4 ELISA Kit豚鼠內皮型一氧化氮合成(eNOS)免疫試劑盒
球孢毛霉核糖體合成蛋白BOP1抗體Human FOXD4L6 ELISA Kit豚鼠內皮1(ET-1)免疫試劑盒
類芽胞桿菌調節中心體分離早期相關激BORA抗體Human FOXE3 ELISA Kit豚鼠免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒
腐霉萊姆病螺旋體抗體Human FOXG1 ELISA Kit豚鼠免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬成熟相關蛋白BOULE抗體Human FOXH1 ELISA Kit豚鼠免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒
側耳伸長因子結合蛋白抗體Human FOXL2 ELISA Kit豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌特異性堿性蛋白Y2抗體Human FOXO4 ELISA Kit豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)免疫試劑盒
: 馴Yu資源名稱: 瓊氏不動桿菌 質量規格:>98%,BRαN已酰基葡糖苷試劑盒氫化原阿片堿
地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質量規格:>98%,BRαL巖藻糖苷試劑盒7-羥基-5,8-二氧基黃烷
季也蒙畢赤酵母Pichia│guilliermondii 質量規格:>98%,BRαL艾杜糖苷試劑盒10-羥基攀援山橙堿
FLAP抑制劑(MK591)紫蓳靈(標準品)英文名稱: tribendimidine活化T核因子1蛋白抗體包裝1g
紫荊皮(標準品)英文名稱: Jionoside B1谷受體1抗體包裝5g
紫萁(標準品)英文名稱: N6022神經元抑制蛋白抗體包裝100g
紫色姜(標準品)英文名稱: Balsalazide神經發育相關調控蛋白抗體包裝25g
紫杉(標準品)英文名稱: Epalrestat 核因子κB抑制蛋白α抗體(IκB-α)包裝25g
紫蘇梗(標準品)英文名稱: Olsalazine disodium磷化核因子NF-κB p65抗體包裝5g
紫蘇(標準品)英文名稱: Olsalazine disodium磷化核因子p50/k基因結合核因子抗體包裝1g
紫蘇烯英文名稱: Pioditazone hydrochloride磷化一氧化氮合成3(內皮型)抗體包裝250mg
紫蘇葉(標準品)英文名稱: Doxifluridine/5-Fluoro-5′-deoxyuridine核酪蛋白激和周期蛋白依賴性激底物1抗體包裝5g
紫蘇子(標準品)英文名稱: IopromideNIFK蛋白抗體包裝100g
紫檀芪(標準品)英文名稱: TRISTEARIN磷化NIFK抗體包裝500g
紫檀香(標準品)英文名稱: Tizanidine hydrochloride核轉錄因子X盒結合蛋白1抗體包裝1g
紫菀(標準品)英文名稱: Tubastatin A Hydrochloride膜磷脂轉移蛋白1抗體包裝25g
紫菀(標準品)英文名稱: Moxonidine hydrochloride神經降壓受體1抗體包裝5g
紫云英苷(標準品)英文名稱: Propiverine hydrochloride神經降壓受體2抗體包裝25g
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