詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
Tivozanib | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
Tivozanib(AV-951;KRN951)是有效,選擇性的VEGFR1/2/3抑制劑,IC50值分別為0.21,0.16,and0.24nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:475108-18-0 別名:AV-951;KRN951 純度:99.46% 分子量:454.86 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
釀酒酵母造血干抗原(多肽抗原)Anti-FADD Antibody人成熟促進因子(MPF)
芹側耳(杏鮑菇)CD147(抗原)Anti-FAIM2 Antibody人成熟促進因子(MPF)
枯草芽孢桿菌CD169抗原Anti-FADD Antibody人去唾液糖蛋白受體(AGSPR)
大腸埃希氏菌B 和 T 淋巴衰減蛋白(抗原)Anti-FAM117B Antibody人去唾液糖蛋白受體(AGSPR)
薄花邊傘周期依賴激2(抗原)Anti-FANCA Antibody人可溶性轉鐵蛋白受體(sTfR)
果生鏈核盤菌周期依賴性激4(抗原)Anti-FANCD2 Antibody人可溶性轉鐵蛋白受體(sTfR)
大腸埃希氏菌人癌胚抗原Anti-FANCC Antibody人金屬硫蛋白(MT)
釀酒酵母蕈堿型乙酰受體M2(抗原)Anti-FAP Antibody人金屬硫蛋白(MT)
奧氏蜜環菌間隙連接蛋白43(多肽片斷抗原)Anti-FANCG Antibody人小扁豆結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)
惡臭假單胞菌間隙連接蛋白45(抗原)Anti-FASN Antibody人小扁豆結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體3(AFP-L3)
鏈格孢II 型膠原(抗原)Anti-FARP2 Antibody人小扁豆結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)
大腸埃希菌表面趨化因子受體1抗原Anti-FASTK Antibody人小扁豆結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體2(AFP-L2)
秀珍菇前列腺氧化環化2(抗原)Anti-FASTKD1 Antibody人小扁豆結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1(AFP-L1)
大腸桿菌C-藻藍(藻藍蛋白)Anti-FASTKD1 Antibody人小扁豆結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1(AFP-L1)
灰色鏈霉菌灰色亞種結締組織生長因子(多肽抗原)Anti-FASTKD2 Antibody人黑色瘤標記物(MART/Melan-A)
枯草芽孢桿菌周期E/原癌基因抗原Anti-FASTKD3 Antibody人黑色瘤標記物(MART/Melan-A)
堿性螺旋-環-螺旋轉錄因子SCXA抗體成團腸桿菌(成團泛菌)人腦星形膠質母細胞瘤
轉錄因子同源框蛋白SIX2抗體阪崎腸桿菌人急性淋巴細胞白血病細胞
硫酯修飾因子1抗體棉花立枯菌人視網膜神經膠質瘤細胞
絲/蘇激33抗體納地青霉人肺支氣管癌細胞
VEGFR1/2/3抑制劑(Tivozanib)枯草芽孢桿 磷酸氫二鈉七水物
臭黃菇 磷酸二氫鈉一水物
靈芝 2-硝基乙酰苯
地衣芽孢桿 六氟異
Deinococcus xibeiensis Wang et al. 硫代乳酸
TA102 鼠傷寒沙門氏 1,3-二羥基萘
薄花邊傘 2 4 6-三磺酸
類芽孢桿屬 代硫代乙酰
果生鏈核盤 β-巰基乙
枯草芽孢桿(質控) 3,5-二水楊酸
葡萄座腔 水楊酸肟酸
Aureimonas 齊墩果酸
慢生土地桿 甘草酸單鹽
阿達青霉 N-異基烯酰
雞汁菇 4-乙基