詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
AS 602801 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
AS602801是一種ATP競爭性的JNK抑制劑,作用于JNK1,JNK2和JNK3,IC50分別為80nM,90nM和230nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:848344-36-5 別名:Bentamapimod;AS602801;AS-602801 分子量:457.55 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
堆形艾耳球蟲Bacillus thuringiensis豬血纖蛋白原(Fbg)
釀酒酵母Bacillus thuringiensis豬透明質(HA)
檸檬形克勒克酵母Bacillus thuringiensis豬透明質(HA)
枯草芽孢桿菌Bacillus thuringiensis豬瘦(LEP)
HymenobacterBacillus thuringiensis豬瘦(LEP)
地衣芽孢桿菌Bacillus thuringiensis豬生長抑(SS)
蜜環菌Bacillus thuringiensis豬生長抑(SS)
蠟狀芽孢桿菌Bacillus thuringiensis豬生長激(GH)
香菇Bacillus thuringiensis豬生長激(GH)
馬齒莧叉梗孢菌Bacillus thuringiensis豬皮質/腎上腺(CORT)
托姆青霉Bacillus thuringiensis豬皮質/腎上腺(CORT)
CohnellaBacillus thuringiensis豬皮質(Cortisol)
腸桿菌屬Bacillus thuringiensis豬皮質(Cortisol)
枯草芽孢桿菌Bacillus thuringiensis豬腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)
豬丹絲菌Bacillus thuringiensis豬腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)
玉蜀黍長蠕孢Bacillus thuringiensis豬內皮1(ET-1)
神經前體細胞表達發育下調蛋白5抗體干酪菌海分枝桿菌
鈉碘單獨轉運蛋白SLC26A4抗體解纖維熱厭氧桿菌威斯康星米勒菌
快速發育生長因子同源蛋白2抗體食砜節桿菌產克雷伯菌
長鏈脂肪轉運蛋白4抗體類白喉棒桿菌烏克曼枸櫞桿菌
JNK抑制劑(AS 602801)SERPINA12 英文名稱: 內臟脂肪組織源性絲酸蛋白酶抑制蛋白抗體 0.2ml
Phospho-Ezrin (Tyr478) 英文名稱: 磷酸化埃茲蛋白抗體 0.1ml
蛋白酶激活受體-1抗體 Anti-PAR-1 0.2ml
Anti-SRC /FITC 熒光素標記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-NFKB p65(Thr254) 磷酸化細胞核因子抗體 規格 0.1ml
EXPB-2 植物延展素-β(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg