詳細介紹
公司產品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產品屬性:
英文名稱:GNE-317
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
商品介紹:
GNE-317是一種PI3K/mTOR抑制劑,能夠穿過血腦屏障(BBB)。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1394076-92-6 純度:98.46% 分子量:414.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
德爾布有孢酵母生物標記的兔抗人IgMAnti-TRPV5 Antibody多巴受體D2(DRD2)
德氏乳桿菌保加利亞亞種辣根過氧化物標記的兔抗人IgMAnti-Trypsin(PRSS1) Antibody多巴受體D1(DRD1)
鏈霉菌屬堿性磷(AP)標記的兔抗人IgMAnti-TSC1 Antibody多巴β羥化(DβH)
雪白根霉膠體金標記的兔抗人IgMAnti-TSARG6(DNAJB13) Antibody多氧化(PAOX)
枯草芽孢桿菌FITC標記的兔抗人IgMAnti-TRPV5 Antibody多調節因子1結合蛋白1(PMFBP1)
微小根毛霉Cy3標記的兔抗人IgMAnti-TSC1 Antibody對氧磷3(PON3)
香菇Cy5標記的兔抗人IgMAnti-TSC2 Antibody(PB0181)對氧磷2(PON2)
枯草芽孢桿菌Cy5.5標記的兔抗人IgMAnti-TSC2 Antibody對氧磷1(PON1)
枯草芽孢桿菌Cy7標記的兔抗人IgMAnti-TSG101 Antibody短腭肺鼻腔上皮癌關聯蛋白3(SPLUNC3)
大腸埃希菌PE標記的兔抗人IgMAnti-TSG101 Antibody短腭肺鼻腔上皮癌關聯蛋白2(SPLUNC2)
塞納加爾彎孢PE-Cy3標記的兔抗人IgMAnti-TSLP Antibody短蛋白聚糖(BCAN)
白球擬酵母PE-CY5標記的兔抗人IgMAnti-TSLP Antibody端錨聚合2(TNKS2)
產紫晶鏈孢囊菌福井亞種APC標記的兔抗人IgMAnti-TSPAN12 Antibody端錨聚合1(TNKS1)
炭疽芽胞桿菌Alexa Fluor 350標記的兔抗人IgMAnti-TSHR Antibody端粒重復結合因子2相互作用蛋白(TERF2IP)
短小芽孢桿菌Alexa Fluor 488標記的兔抗人IgMAnti-TSHR Antibody端粒重復結合因子2(TERF2)
裂蹄層孔菌(可提供)Alexa Fluor 555標記的兔抗人IgMAnti-TTK Antibody端粒重復結合因子1(TERF1)
節律抑制蛋白PER1抗體伴放線放線桿菌小鼠腸靜脈組織提取物胞
節律蛋白2抗體哈氏弧菌小鼠胃粘膜組織提取物
肌側索硬化癥相關蛋白22號染色體抗體解藻弧菌(溶藻弧菌)小鼠小腸粘膜組織提取物
孤兒核受體PAR1抗體Hydrotaleaflava小鼠食管組織提取物
PI3K/mTOR抑制劑(GNE-317)解淀粉芽孢桿解淀粉亞種 阿特拉津
黑曲霉 芥子酸
普里茲灣假交替單胞 5α-膽甾烷
寄生曲霉 橘紅
孢紅鏈霉 印烏堿
葡萄座腔 3-羥基巴戟醌
多殺性巴氏桿* 菠菜甾3-O-β-D-葡萄糖苷
球形賴氨酸芽孢桿 4’-去甲基去氫鬼臼
少根根霉 毛冬青皂苷B1
鐮孢霉(加詞待譯) 毛冬青皂苷B2
楊樹菇 毛冬青皂苷B3
高山被孢霉 冬青苷O
匍枝根霉 車葉草苷酸甲酯
腐生葡萄球 10-甲氧基
冠毛犁頭霉 單密利特苷