詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 發貨周期 |
AZD 6482 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
AZD6482是PI3Kβ抑制劑,IC50為10nM,比對PI3Kδ,PI3Kα和PI3Kγ的抑制性強8,87和109倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1173900-33-8 別名:KIN 193 純度:99.30% 分子量:408.45 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
公司產品僅用于科研細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。
建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環。
多主葡萄殼菌人表皮生長因子Anti-NOXO1 Antibody人脂蛋白α(Lp-α)
葡萄座腔菌人堿性成纖維生長因子Anti-NOX3 Antibody人脂蛋白α(Lp-α)
糙皮側耳大鼠可溶性CD14Anti-NPAS1 Antibody人骨膠原交聯(Cr)
變平滑假絲酵母小鼠β淀粉樣蛋白1-42Anti-NPAS2 Antibody人骨膠原交聯(Cr)
*灰葡萄孢大鼠繆勒管抑制物質/抗繆勒管激Anti-NPHP4 Antibody人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)
枯草芽胞桿菌小鼠8羥基脫氧鳥苷Anti-NPDC1 Antibody人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)
考克氏菌屬人巨噬炎性蛋白5Anti-NPDC1 Antibody人脫氧吡啶/脫氧吡啶啉(DPD)
水稻節桿菌小鼠白介1受體拮抗劑Anti-NPRL2 Antibody人脫氧吡啶/脫氧吡啶啉(DPD)
果生鏈核盤菌大鼠雄激Anti-NR1I3 Antibody人吡啶交聯物(PY)
薄層菌屬人可溶性E選擇Anti-NR4A3 Antibody人吡啶交聯物(PY)
西唐氏鏈霉菌人可溶性間粘附分子1Anti-NR2F2 Antibody人骨橋(OPN)
黑曲霉小鼠降鈣原Anti-NRAS Antibody人骨橋(OPN)
*灰葡萄孢大鼠Toll樣受體4Anti-NRAS Antibody人γ基丁(GABA)
熒光假單胞菌大鼠多巴轉運蛋白Anti-NRBF2 Antibody人γ基丁(GABA)
大腸埃希氏菌小鼠胰島自身抗體Anti-NRIP3 Antibody人P物質受體(SP-R)
擴展短桿菌人間粘附分子2Anti-NRIP2 Antibody人P物質受體(SP-R)
核糖體蛋白S6修飾樣蛋白A抗體長柄條孢牛肝人T淋巴瘤轉基因細胞
環指蛋白213蠟磨屬人T淋巴瘤細胞Jurkat亞系
Rap2A抗體猴頭人前列腺癌高轉移細胞株
受體表達蛋白5/息肉相關蛋白抗體FV21(金針菇)C57小鼠黑色瘤瘤株
PI3Kβ抑制劑(AZD 6482)肉桿 雙吡唑酮
枯草芽孢桿枯草亞種 苯甲酰三氟酮
韓國假單胞 亞芐基酮
香菇 4-氨基苯乙酮
卵形巴貝斯蟲(遼陽株) 3-氨基苯乙酮
紅淡紫灰鏈霉 4-氨基安替比林
根瘤 1,3-二羥基酮
釀酒酵母 聚乙烯吡咯烷酮
梅林青霉 聚乙烯吡咯烷酮
弧 聚乙烯吡咯烷酮
細黃鏈霉 交鏈聚乙烯吡咯烷酮
試劑
黃孢鏈霉 腎上腺酮
蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 乙酰丁香酮
粘質沙雷氏 碳酸胍