詳細介紹
產品屬性:
中文名稱:PERK抑制劑(GSK2656157)
英文名稱:GSK2656157
產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發貨周期:1~3天
公司產品僅用于科研
商品介紹:
英文名稱:GSK2656157 產品規格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg GSK2656157是一種ATP競爭性的PERK抑制劑,IC50值為0.9nM,對其他300多種激酶的活性,IC50值均>100nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他用途! CAS號:1337532-29-2 純度:99.66% 分子量:416.45 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調控;
⑤細胞分化及其調控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
球孢白僵菌脊髓性肌癥蛋白Gemin4抗體Human PSMB9(Proteasome subunit beta type-9) ELISA Kit大鼠粘蛋白/粘液5B(MUC5B)免疫試劑盒
擬莖點霉脊髓性肌癥蛋白Gemin5抗體Human UQCRB ELISA Kit大鼠粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)免疫試劑盒
葡萄座腔菌脊髓性肌癥蛋白Gemin7抗體Human UQCRC2 ELISA Kit大鼠粘蛋白/粘液1(MUC1)免疫試劑盒
硬水黃桿菌GTP結合絲裂原誘導T蛋白抗體Human URAT1 ELISA Kit大鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)免疫試劑盒
中國臺灣根霉染色體卷曲螺旋域包含蛋白1抗體Human UQCRFS1 ELISA Kit大鼠載脂蛋白H(Apo-H)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母脊髓性肌癥蛋白Gemin6抗體Human UQCRQ ELISA Kit大鼠載脂蛋白E(Apo-E)免疫試劑盒
蒼黃擬無枝菌磷化膠質纖維性蛋白抗體Human URB2 ELISA Kit大鼠載脂蛋白C-II(APOC2)ELISA
核果黑腐皮殼菌自主生長因子GFI1抗體Human UQCRH ELISA Kit大鼠載脂蛋白C-I(APOC1)免疫試劑盒
自養假諾卡氏菌G蛋白偶聯受體109A抗體Human URB1 ELISA Kit大鼠載脂蛋白B-48(ApoB48)免疫試劑盒
冷海水黃桿菌γ-銜接蛋白相關蛋白1抗體Human UPK1A ELISA Kit大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)免疫試劑盒
野油菜黃單胞菌棲絨毛致病變種γ-銜接蛋白相關蛋白2抗體Human UPF3B ELISA Kit大鼠載脂蛋白A5(apo-A5)免疫試劑盒
紅酵母γ-銜接蛋白相關蛋白3抗體Human UPK2 ELISA Kit大鼠載脂蛋白A1前體(Pre-Apo-A1)免疫試劑盒
釀酒酵母配子生成抗體Human URM1 ELISA Kit大鼠載脂蛋白A1(apo-A1)免疫試劑盒
半膠蘑菇(暫定名)γ谷酰轉肽2重鏈抗體Human UNC13D/Munc13-4 ELISA Kit大鼠孕受體(PROGR)免疫試劑盒
拜耳接合酵母γ-谷酰轉肽5重鏈抗體Human UPK3B ELISA Kit大鼠孕激/孕(PROG)免疫試劑盒
Promicromonospora磷化GATA結合蛋白3抗體Human CXCR5(C-X-C chemokine receptor type 5) ELISA Kit大鼠鑰孔蟲戚血藍蛋白(KLH)抗體(IgG)免疫試劑盒
尖孢鐮孢Fusarium│oxysporum 質量規格:分析標準品28-去基-β-香樹脂
金針菇Flammulina│velutipes 質量規格:Bentone SD-1,適于中至低性溶劑巖大戟內酯B
棒束孢Isaria│sp. 質量規格:Bentone SD-2,適于中高性溶劑野馬追內酯B
PERK抑制劑(GSK2656157)三葉草根瘤 3-氟-4-甲氧基苯酸鐵蛋白Elisa
Acinetobacter soli 雙(六氟乙基酮)合鎳(II),水合磷酸肌酸激Elisa
少根根霉原變種 甲次硫酸鈉 水合物病性關節炎抗體Elisa
異常漢遜酵母 3-磺基十四烷基二甲基銨網狀內皮增生癥病抗體Elisa
野牡丹尼爾氏酵母 亞鈣水合物可溶性Toll樣受體4Elisa
球孢白僵 鹽酸芐絲肼整合β1Elisa
大腸桿 化鈥(III)六水合物纖調蛋白Elisa
芽孢桿 反式二氨基二化鉑(II), Pt minE鈣粘著蛋白;上皮性鈣黏附蛋白Elisa
黑曲霉 磷酸鑭(III) 水合物 (REO)拓撲異構2Elisa
佛雷德里克斯堡假單胞 2-羧基苯酸鈣結合蛋白Elisa
釀酒酵母 3,5-二甲基-4- 硝基吡啶-2-甲β-骨膠原交聯Elisa
芹側耳(杏鮑菇) 乙二四乙酸鐵鈉鹽纖維蛋白Elisa
枯草芽孢桿 三氟磺酸鋱(III)水合物纖連蛋白Elisa
大腸埃希氏 Fmoc--4-甲酸不飽和脂肪酸Elisa
薄花邊傘 鹽酸伊伐布雷定神經肽YElisa
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)